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- 2026年04月26日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
pACGFP1-N1
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：pACGFP1-N1哺乳荧光质粒
别称: pACGFP1-N1
质粒属性
质粒简介
pAcGFP1-N1质粒是 AcGFP的衍生物，来自Aequorea coerulescens。 AcGFP1已经优化了更亮的荧光。（激发最大值= 475nm;发射最大值= 505nm）AcGFP1基因的编码序列含有沉默碱基变化，其对应于人类密码子使用偏好。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 4726 bp ds-DNA circular SYN 18-10-2015
KEYWORDS Untitled 2
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 4726)
AUTHORS admin
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported 2015-10-18 from MiaoLingPlasmid
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4726
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
enhancer 61..364
/note="CMV enhancer"
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
promoter 365..568
/note="CMV promoter"
/note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early
promoter"
misc_feature 591..671
/note="MCS"
/note="multiple cloning site"
CDS 673..1392
/codon_start=1
/product="Aequorea coerulescens GFP"
/note="AcGFP1"
/note="mammalian codon-optimized"
/translation="MVSKGAELFTGIVPILIELNGDVNGHKFSVSGEGEGDATYGKLTL
KFICTTGKLPVPWPTLVTTLSYGVQCFSRYPDHMKQHDFFKSAMPEGYIQERTIFFEDD
GNYKSRAEVKFEGDTLVNRIELTGTDFKEDGNILGNKMEYNYNAHNVYIMTDKAKNGIK
VNFKIRHNIEDGSVQLADHYQQNTPIGDGPVLLPDNHYLSTQSALSKDPNEKRDHMIYF
GFVTAAAITHGMDELYK"
polyA_signal 1514..1635
/note="SV40 poly(A) signal"
/note="SV40 polyadenylation signal"
rep_origin complement(1642..2097)
/direction=LEFT
/note="f1 ori"
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
promoter 2124..2228
/gene="bla"
/note="AmpR promoter"
promoter 2230..2587
/note="SV40 promoter"
/note="SV40 enhancer and early promoter"
rep_origin 2438..2573
/note="SV40 ori"
/note="SV40 origin of replication"
CDS 2622..3416
/codon_start=1
/gene="aph(3')-II (or nptII)"
/product="aminoglycoside phosphotransferase from Tn5"
/note="NeoR/KanR"
/note="confers resistance to neomycin, kanamycin, and G418
(Geneticin(R))"
/translation="MIEQDGLHAGSPAAWVERLFGYDWAQQTIGCSDAAVFRLSAQGRP
VLFVKTDLSGALNELQDEAARLSWLATTGVPCAAVLDVVTEAGRDWLLLGEVPGQDLLS
SHLAPAEKVSIMADAMRRLHTLDPAT-CPFDHQAKHRIERARTRMEAGLVDQDDLDEEHQ
GLAPAELFARLKASMPDGEDLVVTHGDACLPNIMVENGRFSGFIDCGRLGVADRYQDIA
LATRDIAEELGGEWADRFLVLYGIAAPDSQRIAFYRLLDEFF"
polyA_signal 3648..3695
/note="HSV TK poly(A) signal"
/note="herpesvirus thymidine kinase polyadenylation signal"
rep_origin 4024..4612
/direction=RIGHT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
ORIGIN
1 tagttattaa tagtaatcaa ttacggggtc attagttcat agcccatata tggagttccg
61 cgttacataa cttacggtaa atggcccgcc tggctgaccg cccaacgacc cccgcccatt
121 gacgtcaata atgacgtatg ttcccatagt aacgccaata gggactttcc attgacgtca
181 atgggtggag tatttacggt aaactgccca cttggcagta catcaagtgt atcatatgcc
241 aagtacgccc cctattgacg tcaatgacgg taaatggccc gcctggcatt atgcccagta
301 catgacctta tgggactttc ctacttggca gtacatctac gtattagtca tcgctattac
361 catggtgatg cggttttggc agtacatcaa tgggcgtgga tagcggtttg actcacgggg
421 atttccaagt ctccacccca ttgacgtcaa tgggagtttg ttttggcacc aaaatcaacg
481 ggactttcca aaatgtcgta acaactccgc cccattgacg caaatgggcg gtaggcgtgt
541 acggtgggag gtctatataa gcagagctgg tttagtgaac cgtcagatcc gctagcgcta
601 ccggactcag atctcgagct caagcttcga attctgcagt cgacggtacc gcgggcccgg
661 gatccaccgg tcatggtgag caagggcgcc gagctgttca ccggcatcgt gcccatcctg
721 atcgagctga atggcgatgt gaatggccac aagttcagcg tgagcggcga gggcgagggc
781 gatgccacct acggcaagct gaccctgaag ttcatctgca ccaccggcaa gctgcctgtg
841 ccctggccca ccctggtgac caccctgagc tacggcgtgc agtgcttctc acgctacccc
901 gatcacatga agcagcacga cttcttcaag agcgccatgc ctgagggcta catccaggag
961 cgcaccatct tcttcgagga tgacggcaac tacaagtcgc gcgccgaggt gaagttcgag
1021 ggcgataccc tggtgaatcg catcgagctg accggcaccg atttcaagga ggatggcaac
1081 atcctgggca ataagatgga gtacaactac aacgcccaca atgtgtacat catgaccgac
1141 aaggccaaga atggcatcaa ggtgaacttc aagatccgcc acaacatcga ggatggcagc
1201 gtgcagctgg ccgaccacta ccagcagaat acccccatcg gcgatggccc tgtgctgctg
1261 cccgataacc actacctgtc cacccagagc gccctgtcca aggaccccaa cgagaagcgc
1321 gatcacatga tctacttcgg cttcgtgacc gccgccgcca tcacccacgg catggatgag
1381 ctgtacaagt gagcggccgc gactctagat cataatcagc cataccacat ttgtagaggt
1441 tttacttgct ttaaaaaacc tcccacacct ccccctgaac ctgaaacata aaatgaatgc
1501 aattgttgtt gttaacttgt ttattgcagc ttataatggt tacaaataaa gcaatagcat
1561 cacaaatttc acaaataaag catttttttc actgcattct agttgtggtt tgtccaaact
1621 catcaatgta tcttaaggcg taaattgtaa gcgttaatat tttgttaaaa ttcgcgttaa
1681 atttttgtta aatcagctca ttttttaacc aataggccga aatcggcaaa atcccttata
1741 aatcaaaaga atagaccgag atagggttga gtgttgttcc agtttggaac aagagtccac
1801 tattaaagaa cgtggactcc aacgtcaaag ggcgaaaaac cgtctatcag ggcgatggcc
1861 cactacgtga accatcaccc taatcaagtt ttttggggtc gaggtgccgt aaagcactaa
1921 atcggaaccc taaagggagc ccccgattta gagcttgacg gggaaagccg gcgaacgtgg
1981 cgagaaagga agggaagaaa gcgaaaggag cgggcgctag ggcgctggca agtgtagcgg
2041 tcacgctgcg cgtaaccacc acacccgccg cgcttaatgc gccgctacag ggcgcgtcag
2101 gtggcacttt tcggggaaat gtgcgcggaa cccctatttg tttatttttc taaatacatt
2161 caaatatgta tccgctcatg agacaataac cctgataaat gcttcaataa tattgaaaaa
2221 ggaagagtcc tgaggcggaa agaaccagct gtggaatgtg tgtcagttag ggtgtggaaa
2281 gtccccaggc tccccagcag gcagaagtat gcaaagcatg catctcaatt agtcagcaac
2341 caggtgtgga aagtccccag gctccccagc aggcagaagt atgcaaagca tgcatctcaa
2401 ttagtcagca accatagtcc cgcccctaac tccgcccatc ccgcccctaa ctccgcccag
2461 ttccgcccat tctccgcccc atggctgact aatttttttt atttatgcag aggccgaggc
2521 cgcctcggcc tctgagctat tccagaagta gtgaggaggc ttttttggag gcctaggctt
2581 ttgcaaagat cgatcaagag acaggatgag gatcgtttcg catgattgaa caagatggat
2641 tgcacgcagg ttctccggcc gcttgggtgg agaggctatt cggctatgac tgggcacaac
2701 agacaatcgg ctgctctgat gccgccgtgt tccggctgtc agcgcagggg cgcccggttc
2761 tttttgtcaa gaccgacctg tccggtgccc tgaatgaact gcaagacgag gcagcgcggc
2821 tatcgtggct ggccacgacg ggcgttcctt gcgcagctgt gctcgacgtt gtcactgaag
2881 cgggaaggga ctggctgcta ttgggcgaag tgccggggca ggatctcctg tcatctcacc
2941 ttgctcctgc cgagaaagta tccatcatgg ctgatgcaat gcggcggctg catacgcttg
3001 atccggctac ctgcccattc gaccaccaag cgaaacatcg catcgagcga gcacgtactc
3061 ggatggaagc cggtcttgtc gatcaggatg atctggacga agagcatcag gggctcgcgc
3121 cagccgaact gttcgccagg ctcaaggcga gcatgcccga cggcgaggat ctcgtcgtga
3181 cccatggcga tgcctgcttg ccgaatatca tggtggaaaa tggccgcttt tctggattca
3241 tcgactgtgg ccggctgggt gtggcggacc gctatcagga catagcgttg gctacccgtg
3301 atattgctga agagcttggc ggcgaatggg ctgaccgctt cctcgtgctt tacggtatcg
3361 ccgctcccga ttcgcagcgc atcgccttct atcgccttct tgacgagttc ttctgagcgg
3421 gactctgggg ttcgaaatga ccgaccaagc gacgcccaac ctgccatcac gagatttcga
3481 ttccaccgcc gccttctatg aaaggttggg cttcggaatc gttttccggg acgccggctg
3541 gatgatcctc cagcgcgggg atctcatgct ggagttcttc gcccacccta gggggaggct
3601 aactgaaaca cggaaggaga caataccgga aggaacccgc gctatgacgg caataaaaag
3661 acagaataaa acgcacggtg ttgggtcgtt tgttcataaa cgcggggttc ggtcccaggg
3721 ctggcactct gtcgataccc caccgagacc ccattggggc caatacgccc gcgtttcttc
3781 cttttcccca ccccaccccc caagttcggg tgaaggccca gggctcgcag ccaacgtcgg
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4321 taaggcgcag cggtcgggct gaacgggggg ttcgtgcaca cagcccagct tggagcgaac
4381 gacctacacc gaactgagat acctacagcg tgagctatga gaaagcgcca cgcttcccga
4441 agggagaaag gcggacaggt atccggtaag cggcagggtc ggaacaggag agcgcacgag
4501 ggagcttcca gggggaaacg cctggtatct ttatagtcct gtcgggtttc gccacctctg
4561 acttgagcgt cgatttttgt gatgctcgtc aggggggcgg agcctatgga aaaacgccag
4621 caacgcggcc tttttacggt tcctggcctt ttgctggcct tttgctcaca tgttctttcc
4681 tgcgttatcc cctgattctg tggataaccg tattaccgcc atgcat
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：pACGFP1-N1哺乳荧光质粒
别称: pACGFP1-N1
| 启动子: | CMV |
|---|---|
| 复制子: | pUC |
| 终止子: | SV40 poly(A) signal |
| 质粒分类: | 哺乳系列质粒；哺乳荧光质粒；哺乳绿色质粒 |
| 质粒大小: | 4726bp |
| 质粒标签: | C-GFP |
| 原核抗性: | Kan |
| 筛选标记: | G418 |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
| 表达宿主: | 293T等哺乳细胞 |
| 培养条件: | 37℃，5%CO2 |
| 诱导方式: | 无须诱导，瞬时表达 |
| 5'测序引物: | CMV-F（CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG） |
| 3'测序引物: | Sv40-polyA-R (GAAATTTGTGATGCTATTGC) |
质粒属性
| 载体宿主： | 哺乳细胞 |
|---|---|
| 载体用途： | 蛋白表达 |
| 基因种属： | 空载体 |
| 基因类型： | ORF |
| 原核抗性： | Kan |
| 真核抗性： | Neo/G418 |
| 荧光蛋白： |
质粒简介
pAcGFP1-N1质粒是 AcGFP的衍生物，来自Aequorea coerulescens。 AcGFP1已经优化了更亮的荧光。（激发最大值= 475nm;发射最大值= 505nm）AcGFP1基因的编码序列含有沉默碱基变化，其对应于人类密码子使用偏好。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 4726 bp ds-DNA circular SYN 18-10-2015
KEYWORDS Untitled 2
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 4726)
AUTHORS admin
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported 2015-10-18 from MiaoLingPlasmid
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4726
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
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/note="CMV enhancer"
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
promoter 365..568
/note="CMV promoter"
/note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early
promoter"
misc_feature 591..671
/note="MCS"
/note="multiple cloning site"
CDS 673..1392
/codon_start=1
/product="Aequorea coerulescens GFP"
/note="AcGFP1"
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/translation="MVSKGAELFTGIVPILIELNGDVNGHKFSVSGEGEGDATYGKLTL
KFICTTGKLPVPWPTLVTTLSYGVQCFSRYPDHMKQHDFFKSAMPEGYIQERTIFFEDD
GNYKSRAEVKFEGDTLVNRIELTGTDFKEDGNILGNKMEYNYNAHNVYIMTDKAKNGIK
VNFKIRHNIEDGSVQLADHYQQNTPIGDGPVLLPDNHYLSTQSALSKDPNEKRDHMIYF
GFVTAAAITHGMDELYK"
polyA_signal 1514..1635
/note="SV40 poly(A) signal"
/note="SV40 polyadenylation signal"
rep_origin complement(1642..2097)
/direction=LEFT
/note="f1 ori"
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
promoter 2124..2228
/gene="bla"
/note="AmpR promoter"
promoter 2230..2587
/note="SV40 promoter"
/note="SV40 enhancer and early promoter"
rep_origin 2438..2573
/note="SV40 ori"
/note="SV40 origin of replication"
CDS 2622..3416
/codon_start=1
/gene="aph(3')-II (or nptII)"
/product="aminoglycoside phosphotransferase from Tn5"
/note="NeoR/KanR"
/note="confers resistance to neomycin, kanamycin, and G418
(Geneticin(R))"
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VLFVKTDLSGALNELQDEAARLSWLATTGVPCAAVLDVVTEAGRDWLLLGEVPGQDLLS
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replication"
ORIGIN
1 tagttattaa tagtaatcaa ttacggggtc attagttcat agcccatata tggagttccg
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421 atttccaagt ctccacccca ttgacgtcaa tgggagtttg ttttggcacc aaaatcaacg
481 ggactttcca aaatgtcgta acaactccgc cccattgacg caaatgggcg gtaggcgtgt
541 acggtgggag gtctatataa gcagagctgg tttagtgaac cgtcagatcc gctagcgcta
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1261 cccgataacc actacctgtc cacccagagc gccctgtcca aggaccccaa cgagaagcgc
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1741 aatcaaaaga atagaccgag atagggttga gtgttgttcc agtttggaac aagagtccac
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1861 cactacgtga accatcaccc taatcaagtt ttttggggtc gaggtgccgt aaagcactaa
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2161 caaatatgta tccgctcatg agacaataac cctgataaat gcttcaataa tattgaaaaa
2221 ggaagagtcc tgaggcggaa agaaccagct gtggaatgtg tgtcagttag ggtgtggaaa
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2401 ttagtcagca accatagtcc cgcccctaac tccgcccatc ccgcccctaa ctccgcccag
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3061 ggatggaagc cggtcttgtc gatcaggatg atctggacga agagcatcag gggctcgcgc
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3301 atattgctga agagcttggc ggcgaatggg ctgaccgctt cctcgtgctt tacggtatcg
3361 ccgctcccga ttcgcagcgc atcgccttct atcgccttct tgacgagttc ttctgagcgg
3421 gactctgggg ttcgaaatga ccgaccaagc gacgcccaac ctgccatcac gagatttcga
3481 ttccaccgcc gccttctatg aaaggttggg cttcggaatc gttttccggg acgccggctg
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质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P2801/pENTR223-FGFR1OP（2点突变）人源基因质粒 |
| P2802/pENTR223-TRPV5人源基因质粒 |
| P2804/pENTR223-TENT5C（1同义突变）人源基因质粒 |
| P2805/pENTR223-MCM7人源基因质粒 |
| P2806/pENTR223-RASSF8人源基因质粒 |
| P2807/pENTR223-NSDHL（1同义突变）人源基因质粒 |
| P2808/pENTR223-CD46人源基因质粒 |
| P2809/pENTR223-ZSCAN9人源基因质粒 |
| P2810/pENTR223-PPME1人源基因质粒 |
| P2811/pENTR223-MBOAT2（244-1296bp）人源基因质粒 |
| P2812/pENTR223-ACKR3-A682G（一同义突变）人源基因质粒 |
| P2813/pENTR223-PHF7（2同义突变）人源基因质粒 |
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文献和实验相关实验
选用简并程度低的密码子, 例如选用只有一种密码子的Met, 3'端应不存在简并性。否则可能由于产量低而看不见扩增产物.现已成功地克隆了猪尿酸氧化酶基因、糖尿病相关肽基因和哺乳动物与禽类的嗜肝病毒基因。用脱氧肌苷(deoxyinosine;DI)引物进行PCR ，可以代替编码蛋白的多种简并密码子中的简并碱基，DI的特异性主要受cDNA浓度影响。 简并引物的设计： 简并引物是根据某些特定的目的而选用的一组混合物，指在寡核甘酸的某一位置(一个简并位)上有多个碱基存在
图腾，图中心的红色生殖细胞则是传递遗传信息的关键。首次建立原始生殖细胞基因表达的表观遗传调控坐标，为哺乳动物生殖细胞表观遗传重编程及 DNA 甲基化隔代遗传等提供了理论依据。主页链接http://www.cell.com/cell/fulltext/S0092-8674(15)00563-208 中西合璧看到这张《The Lancet Gastroenterology & Hepatology》的封面，巧妙地将中式龙与英式龙衔接，绘制相应的病菌分布及表现体征。主页链接http://www
导致这次墨西哥和美国等发生疫情的病毒为Ａ型流感病毒，Ｈ１Ｎ１亚型猪流感病毒毒株，该毒株包含有猪流感、禽流感和人流感三种流感病毒的基因片断，是一种新型猪流感病毒，可以人传染人。 世卫组织多次表明，虽然这种新型病毒是由猪流感病毒演变而来，但到目前为止这种病毒只是使人患病，还没有发现猪被感染的病例。 流感病毒有三种类型：甲型（A型）流感病毒感染哺乳动物以及鸟类；乙型（B型）流感病毒只感染人类，疾病的产生通常较甲型病毒温和；丙型（C型）流感病毒只感染人类，并不会引起严重的疾病
pACGFP1-N1哺乳荧光质粒
￥100 - 1000
