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100 mL
0.25%胰蛋白酶消化液(含EDTA,含酚红)
产品描述
胰酶在 37℃ pH 8.0 条件下消化能力最强。常用胰酶工作浓度为 0.25%。EDTA 可以螯合钙镁离子,胰酶溶液中搭配 EDTA 使用可以加速细胞间连接蛋白的水解,起到增强消化的效果。酚红是一种 pH 指示剂,溶液偏碱性时呈紫红色,偏酸性时呈橘红色,近中性时呈粉红色。
本产品含 0.25%胰蛋白酶,溶于 Hank’s 缓冲液,添加 0.9 mM EDTA,含酚红指示剂,经 0.22 μm 过滤除菌。
订购信息
| 产品名称 | 货号 | 规格 |
| 0.25%胰蛋白酶消化液(含EDTA,含酚红) | AC15L811 | 100 mL |
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文献和实验的 PBS)离心洗涤 1~2 次; 若悬液中有明显的沉淀块,需用 200~300 目的滤网过滤后再用细胞染色 buffer(或含 1%BSA 的 PBS)洗涤 1~2 次; 用细胞染色 buffer(或含 1%BSA 的 PBS)调整浓度至 1x107/mL 备用。 六、贴壁细胞的制备 吸除培养基上清液,用含无钙、镁离子的PBS漂洗一次; 以 25 mL 培养基为例,加入 1 mL 消化液(0.1%胰蛋白酶),置室温(25℃)或 37℃ 消化 2~5 min;或者加入 1 mL 的 EDTA
动物细胞培养中Hanks液、D-Hanks液和消化液的配制方法
室一般用1:250(GRC公司生产)。胰蛋白酶对细胞的分离效果与细胞的类型、特性和瓶壁表面特性有关。一般来说浓度大、温度高(勿高于37℃)、作用时间长,则对细胞分离能力大。但超过一定程度会损伤细胞,导致细胞传代后不能贴壁或死亡。胰酶在pH 8.0、37℃时消化能力最强。溶液中的Ca2+、Mg2+和血清会降低胰酶活力,所以配制胰酶时须用无Ca2+、Mg2+的D-Hanks液。当消化结束时,可加入少量血清或含血清的培养基以终止胰酶作用。 细胞传代使用的胰酶浓度是0.25%或0.2%。用于原代细胞培养消化
酚红 0.02g 溶于1000ml水中 染色体的G带核型实验中胰蛋白酶用生理盐水配制。 二、EDTA溶液 又称versene,一般用其钠盐,因可溶性较好。有些组织需要Ca2+ 、Mg2+ 来保持其完整性,用EDTA来排除这些离子,可使细胞之间裂解,以分散细胞。其作用比胰蛋白酶缓和。使用浓度为0.02%,以无钙、镁的平衡











