- ￥137
- gelatins
- 国内
- JC-A78372
- 2025年12月29日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
37℃培养箱中
- 英文名：
胰酶（Trypsin-EDTA 0.25%）（含酚红）
- 库存：
179
- 供应商：
上海机纯实业有限公司
- 规格：
100ml
概述
胰酶（Trypsin-EDTA）是常用的细胞分离试剂，为223个氨基酸组成的单链多肽，是胰蛋白酶原（Trypsinogen）在Lys6和Ile7之间切除氨基N末端6肽（Hexapeptide）得到的。胰酶属于丝氨酸水解酶家族，活化位点包括His46和Ser183，胰酶裂解Lysine的羧基末端和Arginine的氨基末端，水解效率在任何一端存在酸性氨基酸时降低，而当Proline存在于裂解位点的羧基末端一侧时，水解反应不能发生。胰酶的佳使用pH值为7.2-9.2。
操作步骤
注：使用前将胰酶解冻，保存在4℃，建议不要反复冻融。
1. 移除细胞培养瓶/皿中的培养液，用适量不含钙和镁离子的PBS或D-PBS快速冲洗细胞1-2次，完全移除培养瓶/皿中的液体；
2. 加入适量（250px培养皿加入0.5ml）胰酶，转动培养瓶/皿，让细胞和胰酶充分接触；
3. 置于37℃培养箱中，孵育1-5min（不同细胞类型有所不同）；
4. 轻轻磕击培养瓶/皿，在倒置显微镜下观察，大多数细胞荧光橙悬浮状态；
5. 加入培养基，用移液管吹打5-10次，按照实验要求将细胞种植到新的培养瓶/皿中。
注意事项
1. 胰酶对细胞有损伤，应尽量缩短孵育时间；
2. 如果细胞培养在不含血清的培养基中，胰酶消化完毕，加入PBS，500×g离心10分钟，移除PBS，将细胞重悬于所用的培养基中。
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
- 作者
- 内容
- 询问日期
文献和实验和 p53 的低水平表达。培养液：MEM（含 2 mM L - 谷氨酰胺和 Earle's BSS，1.5 g/L NaHCO3, 0.1 mM 非必需氨基酸，1.0 mM 丙酮酸钠）， 10% 胎牛血清传代：吸去培养液。用 0.25%（w/v）Trypsin- 0.53 mM EDTA 洗一次，以去除血清（血清会抑制胰酶活性）。加 2 - 3 毫升 Trypein-EDTA，放 37℃ 培养箱内约 5 分钟，直到细胞全部脱落。加 6 - 8 毫升培养液，用移液器把细胞吹散。加适量的细胞到新的培养器皿中
-15 ml新鲜培养基之培养角瓶中， 待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可， 如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。 12. 附着性细胞继代时所使用之trypsin-EDTA 浓度？应如何处理？ 一般使用之trypsin-EDTA 浓度为0.05% trypsin-0.53 mM EDTA Na4。第一次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中， 保存于-20 ℃，避免反复冷冻解冻造成trypsin 之活性降低， 并可减少污染之机会。 13. 欲将一般动物
化解离形成细胞悬液，传代培养时也需要将贴壁细胞从瓶壁上消化下来，常用的消化液有胰酶（Trypsin）溶液和EDTA溶液，有时也用胶原酶（collagenase）溶液。 1.胰酶溶液：胰酶活性可用消化酪蛋白的能力表示，常见有1：125和1：250，即一份胰酶可消化125或250份酪蛋白。组织培养用胰酶溶液一般配制成0.1-0.25%浓度，配制时要用不含Ca2+、Mg2+及血清的平衡盐溶液（如前面的D-Hank"s），因为这些物质会对胰酶产生抑制作用。胰酶作用及溶解的最佳pH
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
