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- Xybio
- 上海
- P3654
- 2026年01月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
NM_002596.3;PCTAIRE;PCTAIRE3;PCTK3
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
名称：pCMV-SPORT6-CDK18(1点突变）人源基因质粒
别称: NM_002596.3;PCTAIRE;PCTAIRE3;PCTK3
复制子: pUC
原核抗性: Amp
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主：大肠杆菌
载体用途：PCR模板
基因种属：人
基因类型：cDNA
原核抗性：Amp
真核抗性：
荧光蛋白：
质粒简介
pCMV-SPORT6-CDK18(1点突变）人源基因质粒。
质粒图谱
质粒序列：详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P2864/pENTR223-IKBKG人源基因质粒 |
| P2865/pENTR223-CCDC91-G850A人源基因质粒 |
| P2866/pENTR223-PELI2人源基因质粒 |
| P2867/pENTR223-PHKG2人源基因质粒 |
| P2868/pENTR223-OSGEPL19（34-1278bp1同义突变）人源基因质粒 |
| P2869/pENTR223-MITF-T1234G人源基因质粒 |
| P2870/pENTR223-UBAC1人源基因质粒 |
| P2871/pENTR223-SERBP1-C1108T人源基因质粒 |
| P2872/pENTR223-DCTN2人源基因质粒 |
| P2873/pENTR223-NOL4（343-1611bp）人源基因质粒 |
| P2888/pENTR223-GOT2-T1283C人源基因质粒 |
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文献和实验-crRNA 和加长 pre-crRNA 融合构建了 crRNA-Cpf1 系统，在水稻中的编辑效率最高可达 41.2%;HU 等也将 LpCpf1 和 crRNA 整合开发了 CRISPR-Cpf1 系统，并利用该系统成功实现水稻内源基因的定点编辑;KIM 等开发了 Cpf1–RNP(ribonucleoprotein) 系统，并成功利用该系统对大豆和烟草的内源基因进行定点突变。此外，BEGEMANN 等将 Cpf1、crRNA 和供体片段构成融合表达载体，对水稻叶绿素 a 加氧酶基因 OsCAO
，所有的5个Gateway?入门载体提供了Kozak 序列。此外，pENTR?11提供了SD (Shine-Dalgarno)序列，便于在大肠杆菌中有效的翻译。C Gateway?改造过的cDNA文库如果您已经有了用Gateway兼容载体构建的cDNA文库，您就可以通过pDONRTM载体和BP ClonaseTM酶混合物进行一个简单的重组反应，很容易地把单个克隆转换成Gateway?入门克隆。这样就不再需要亚克隆和测序，为您节约数小时的时间。SuperScript cDNA文库使用pCMV·SPORT构建，有几种
目的基因的细胞株。 插入外源基因的克隆位点包括Sal1、BamH1和EcoR1位点。注意在此载体 中有二个EcoR1位点存在。 2. pEGFP, 增强型绦色荧光蛋白表达载体 (Enhanced Fluorecent Protein Vector) 特点: pEGFP表达载体中含有绿色荧光蛋白，在PCMV启动子驱动下，在真核细胞中高水平表达。载体骨架中的SV40 origin使该载体在任何表达SV40 T 抗原的真核细胞内进行复制。Neo抗性盒由SV40早期
