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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负20℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
pGADT7-MP10
- 库存:
50
- 供应商:
LSM BIO
- 规格:
2ug
pGADT7-MP10
PVT38890 2ug
pGADT7-MP10 Description
Alias:Clone strain:DH5a
Culture conditions:37centigrade
Host:
Gene type:ORF
Prokaryotic resistance:Amp
Use:hybridization
Note:
Caution:
1. This product is FOR RESEARCH USE ONLY!
2. The item is lyophilized form, Please take the powder plasmid by centrifugation at 5000rpm/min for 1min. Add 20ul ddH2O in to the tube of plasmid.
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文献和实验tianjiaoya 我想构建一个真核表达质粒,用这个真核表达质粒来表达绿色荧光蛋白,但是我想让绿色荧光蛋白的表达受酵母菌GLA4转录因子的调控,也就是说有GLA4存在,这个质粒就表达绿色荧光蛋白,没有GLA4存在,就不表达绿色荧光蛋白。当然需要对真核表达质粒上的启动子做相应的调整,但是我现在的问题是,转录因子GLA4能不能对质粒上有相应调控元件的表达盒,进行调控?据说GLA4上有核定位元件,要是将这个核定位序列删除,可行吗?据说核内有很多的辅助因子,参与了蛋白
构建 ① 设定温度梯度(26-35°C)和时间梯度(12-72 h),对龙须菜进行高温胁迫。 ② 提取龙须菜总RNA(RNA提取按照Qiagen试剂盒说明书进行,RNeasy Plant Mini Kit,Qiagen)。 ③ 应用SMART技术构建龙须菜高温胁迫表达cDNA文库,3’和5’引物分别加接酶切位点。 4.文库筛选载体构建 将龙须菜高温胁迫表达文库cDNA双酶切,连入同样双酶切的AD 克隆质粒pGADT7中,用PEG/LiAc 转化
开始做酵母双杂交了,计划用一个膜蛋白去筛库,已经做好了工作量大,而预期结果要靠点小运气的心理准备,面前真是一条很长的路要走! 在丁香园学习了很久,希望能将我这次试验过程中遇到的困难和思索记录下来,跟大家一同讨论,共同学习。 今天先说说实验之前的试剂准备,为了保证实验能顺利进行,我选择了clontech的matchmaker gold系统,订购了人脑cDNA文库(标准化的),还有培养基也是订的商品化的,再有一个提酵母质粒的KIT 1,GOLD系统式对系统3的升级版,替换了一个报告
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