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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负20℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
pEX18Tet-phes
- 库存:
50
- 供应商:
LSM BIO
- 规格:
2ug
pEX18Tet-phes
PVT36316 2ug
pEX18Tet-phes Description
Alias:Clone strain:DH5a
Culture conditions:37centigrade
Host:
Gene type:
Prokaryotic resistance:Tet
Use:Gene knockout
Note:
Caution:
1. This product is FOR RESEARCH USE ONLY!
2. The item is lyophilized form, Please take the powder plasmid by centrifugation at 5000rpm/min for 1min. Add 20ul ddH2O in to the tube of plasmid.
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文献和实验态就是细菌吸收转化因子的生理状态,只有发展为感受态的细胞才能稳定摄取外来的DNA分子。pUC18的LacZ基因区域当有DNA插入时,LacZ基因失活,转化进入大肠杆菌并在含有IPTG和X-gal培养基生长时,会产生白色的克隆,不含插入片段的pUC18质粒进入宿主细胞生成蓝色菌落。 DNA分子转化分以下几步: 1、 吸附--双链DNA分子吸附于受体菌表面; 2、 转入--双链DNA分子解链。一条链进入受体菌,另一条降解; 3、 自稳--外源质粒DNA分子在细胞内复制成双链; 4、 表达一供体基因
实验目的制备出感受态细胞,把体外重组的DNA引入受体细胞,使受体菌具有新遗传性,并从中选择出转化子。实验原理感受态就是细菌吸收转化因子的生理状态,只有发展为感受态的细胞才能稳定摄取外来的DNA分子。pUC18的LacZ基因区域当有DNA片段插入时,LacZ基因失活,转化进入大肠杆菌并在含有IPTG和X-gal培养基生长时,会产生白色的克隆,不含插入片段的pUC18质粒进入宿主细胞生成蓝色菌落。实验操作(一)受体菌的培养与CaCl2 处理(无菌操作)1、取0.3ml种子液接到装有30 ml LB
。 利用哺乳动物细胞表达外源基因时,大多数情况下不需要诱导,但当表达产物对细胞有毒性时应采取诱导,这样可避免表达产物产生早期就对细胞产生影响。哺乳动物细胞中用到的诱导型载体主要与启动子有关如热休克蛋白启动子可在高温下被诱导,还有重金属、糖皮质激素诱导的启动子。但这些系统存在一些共同的缺陷,如诱导表达特异性差;当系统处于关闭状态时表达有泄漏诱导剂本身有毒性,常对细胞造成损伤等。 为此,Gossen等构建了受四环素负调节的Tet-on基因表达系统,该系统由调节质粒和反应质粒组成。调节质粒中具有编码转录
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