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晶莱生物
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三条siRNA干扰片段合成,三保一
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组
RNA干扰(RNA interfering,RNAi)现象是指由与靶基因序列同源的双链RNA(DsRNA)引发的基因转录后的沉默过程,小干扰RNA特异性介导相同序列的mRNA降解,阻断相应基因表达。我们为您提供的RAN干扰技术包括化学合成小RNA片段(SiRNA)和构建载体RNA(SnRNA)两种形式,客户只需提供干预基因名称或基因序列ID,我们免费设计合适的干预位点,保证至少有一对小RNA有效抑制目的基因表达,抑制效率不低于70%。
RNA干扰流程
步骤一 确定干扰基因,设计并合成合适的小干扰RNA(片段型或载体型小干扰RNA)。
步骤二 预转染实验,进行细胞培养,摸索转染条件、时间并进行必要的检测(WB,PCR 等),确定干预效果最佳的一对小RNA。
步骤三 正式实验,设置合理实验分组,进行瞬时或稳定转染。
步骤四 转染后检测,根据实验要求选择细胞生物学检测、蛋白检测、分子生物学检测等。以研究小干扰RNA对于细胞、蛋白或基因功能的影响。

晶莱生物服务流程

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【平台项目开展范围】慢病毒,腺病毒,RNAi类,分子生物实验,病理实验,免疫学实验,细胞实验,动物实验,蛋白组学实验,芯片类实验,并为广大客户朋友们提供课题设计指导、基金申请指导等服务。
【北京公司】北京经济技术开发区科创十三街12号院德为科技园1号楼5层
【长沙公司】长沙市高新区麓谷大道627号新长海中心A1-1203室
【晶莱生物】已开展了数千个实验外包项目。我们专注于医学课题研究,已从课题申请、方案设计、试剂采购、模型构造、标本检测、数据分析,各个环节积累了数千个成功案例经验,为数千个来自临床的科研工作者解决了大量的科研问题。更多相关实验服务信息请咨询晶莱生物。
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文献和实验RNA干扰载体主要用来研究基因表达调控,RNA干扰技术已已被广泛用于基因结构功能研究和传染性疾病及基因治疗领域,进行RNA干扰实验首先是构建RNA干扰载体,本文以pRI系列载体为例论述了干扰载体的构建的实验流程。 产品技术背景 pRI系列载体是基于III类rna聚合酶启动子:人类H1启动子的专用于哺乳动物细胞RNA干扰的载体。H1启动子在哺乳动物细胞内合成类似siRNA分子的小分子RNA。由于H1启动子有精确的转录起始位点和终止
siRNA合成——HPLC纯化,100%去除单链RNA。 2)化学修饰siRNA——2’-Fluoro或2’-OMe提高siRNA在血清和培养基中的稳定性,作用时间长于普通siRNA。 3)荧光标记siRNA——标记后的siRNA可用于流式细胞仪 、荧光显微镜 和激光共聚焦检测,可以方便监测转染效率,优化转染条件。 1、microRNA(miRNA)干扰载体构建 *第二代RNA干扰载体平台,更高干扰效率和RNA干扰片段设计成功率。 *采用
产品技术背景 pRI系列载体是基于III类RNA聚合酶启动子:人类H1启动子的专用于哺乳动物细胞RNA干扰的载体。H1启动子在哺乳动物细胞内合成类似siRNA分子的小分子RNA。由于H1启动子有精确的转录起始位点和终止信号,H1启动子转录产物精确生成人工设计的shRNA,shRNA经过RISC剪切后形成有2个U突出末端的成熟siRNA。由于H1启动子对转录产物长度的严格限制,基本上杜绝了非特异性干扰片段的产生,将载体转染细胞后对其它基因的影响降到最低。 pRI系列载体已经成功用于多种
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