- ￥550
- 环凯
- CRM007
- 广州
- 2026年01月26日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
9999
- 英文名：
Chromogenic E.coli O157:H7 Agar
- 保质期：
贮存期2年。
- 供应商：
环凯微生物
- 保存条件：
2-8℃，贮存于避光、干燥处。
- 规格：
1000ml/瓶
通用名称：大肠杆菌O157显色培养基
【产品编号与包装规格】
| 产品编号 |
产品类型 |
包装规格 |
| CRM007 |
干粉 |
1000mL/瓶 |
| SR0200 |
配套试剂 |
10支/盒 |
【产品用途】大肠杆菌O157:H7显色培养基可用于大肠杆菌O157:H7的快速分离和鉴定。
【检验原理】蛋白胨、酵母膏粉提供碳源和氮源；氯化钠可维持均衡的渗透压；琼脂是培养基的凝固剂；亚碲酸钾抑制非大肠杆菌O157:H7菌的生长；混合色素与大肠杆菌O157:H7所具有的酶发生特异性反应，水解底物，释放出显色基团，产生紫红色的菌落
【配方成分】
| 成分 |
含量（每升） |
成分 |
含量（每升） |
| 蛋白胨 |
6.0g |
琼脂 |
15.0g |
| 酵母膏粉 |
2.0g |
选择性添加剂 |
0.0005g |
| 氯化钠 |
5.0g |
色素混合物 |
1.2g |
| 蒸馏水 |
1000ml |
最终pH |
7.0±0.2
|
【使用方法】称取大肠杆菌显色培养基29.2g，加入蒸馏水或去离子水1000mL，搅拌加热煮沸至完全溶解，待冷至50℃左右，在无菌环境中，每100 mL培养基加入1支配套添加剂，混匀倾注灭菌平皿，待凝固后，备用。
【质量控制】下列质控菌株接种后于35～37℃培养24h，观察结果如下表：
| 指标 |
质控菌株及编号 |
标准值 |
特征性反应 |
| 生长率 |
大肠埃希氏菌O157:H7 NCTC12900 |
PR≥0.5 |
品（紫）红色菌落 |
| 特异性 |
大肠埃希氏菌ATCC25922 |
—— |
蓝绿色菌落 |
| 大肠埃希氏菌O157FSCC(I)149033152 |
品红色菌落 |
||
| 选择性 |
奇异变形杆菌CMCC(B)49005 |
G≤1 |
—— |
| 粪肠球菌ATCC29212 |
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文献和实验反应，其中对照组一只有质粒载体无外源DNA；对照组二只有外源DNA片段没有质粒载体。 二、 E. coli DH5α感受态细胞的制备及转化 每组连接反应混和物各取2μl转化E. coli DH5α感受态细胞。具体方法见第三章。 三、 重组质粒的筛选 1、每组连接反应转化原液取100μl用无菌玻棒均匀涂布于筛选培养基上,37℃下培养半小时以上,直至液体被完全吸收。 2、倒置平板于37℃继续培养12-16小时,待出现明显而又未相互重叠的单菌落时拿出平板。 3、放于4℃数小时,使显色完全
。 5、将eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。 6、用微量离心机4℃下12000g离心10分钟。 7、用无菌牙签从eppendorf管中去除细菌碎片。 8、取20ml进行电泳检查。 [注意] 1. 对大肠杆菌可从固体培养基上挑取单个菌落直接进行煮沸法提取质粒DNA。 2. 煮沸法中添加溶菌酶有一定限度,浓度高时,细菌裂解效果反而不好。有时不同溶菌酶也能溶菌。 3. 提取的质粒DNA中会含有RNA,但RNA并不干扰进一步实验,如限制性内切
振荡3秒钟。 5、将eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。 6、用微量离心机4℃下12000g离心10分钟。 7、用无菌牙签从eppendorf管中去除细菌碎片。 8、取20ml进行电泳检查。 [注意] 1. 对大肠杆菌可从固体培养基上挑取单个菌落直接进行煮沸法提取质粒DNA。 2. 煮沸法中添加溶菌酶有一定限度,浓度高时,细菌裂解效果反而不好。有时不同溶菌酶也能溶菌。 3. 提取的质粒DNA中会含有RNA,但RNA并不干扰进一步实验,如限制性内切
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