蛋白表达量低,并且多是包涵体形式,请问,如果做EMSA,该如何让改进,可以获得大量的、可溶性的蛋白?我是采用原核表达呢,是要更换表达载体?还是更换原核菌株?感谢高手指点!
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我们最近也在做这个,做了一个月,各种优化原核表达的条件,还是多数以包涵体的形式存在。处理方法:1、换载体,我们用的标记基因蛋白可能大了,把GST换成了His,不知道结果怎样。2、用Thermo的试剂盒,它能把包涵体中的蛋白复性,但是价格也不便宜3、技术指导说可以用上清直接和探针结合,毕竟还是有上清还是有少量可溶性蛋白的。不知道对你有没有帮助,你可以试试
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