关键词: MTT
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问:我前两天做了两板,孵育四小时候,把液体倒出時发现MTT还原物也被倒出了一些!结果很不好!而且用移液枪吸出的也带有还原物!我该怎么办呢?问题2:由于我所作的药溶解度非常低一百多微克每毫升就析出!使等倍稀释很不准!有什么办法解决?我们在Hanks液里加了牛血清白蛋白提高溶解度可行吗?不是说血清会影响结果吗?
丁香网友山百合认为:1、注意细胞状态,细胞状态好的时候不会掉;或者倒液前离心;2、药物可用DMSO溶解成母液,一般为使用浓度的0.1%左右,不过液有文献报道用1%,我看的文献有用1%、0.5%、0.1%的,尽可能要使工作液中DMSO的含量低,以免影响细胞生长状态。不要加蛋白促溶,一方面是否能起促溶作用不明确,另一方面蛋白可以吸附药物,尤其是小分子药物
问:大家都是用DMSO吗?怎么看到有的文献是用HCl-isopropanol溶液,然后570nm测定?
丁香网友chinaefulle认为:DMSO的使用比盐酸-异丙醇方便,至少盐酸-异丙醇溶液你还得配置,而DMSO拿来就可以用,而且使用浓盐酸时你得小心一点,要注意安全。而DMSO就没有这么麻烦。当然DMSO和盐酸-异丙醇都可以用来裂解细胞溶解被还原的MTT,如果手头上没有DMSO,用盐酸-异丙醇溶液也是可以的。至于盐酸-异丙醇如何配置可以查查书,不好意思,因为很少用,忘啦!
问:MTT还能用于组织标本中的细胞增殖检测啊?该怎么弄呢?
丁香网友chinaefulle认为:应当可以,只要组织是活的,因为MTT检测与琥珀酸脱氢酶活性有关,只要组织中有此酶,MTT反应同样会发生。当然组织需要匀浆。申明以下,以上是理论推测,我还没试过,如有人试过,不妨也来交流交流。
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你所在的学校的补助在全国是什么水平?
还记得你在读研时,所在学校的补助是多少吗~?读博的也可以说说呀。我的好少,有点想哭。
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科研汪也想有春天:告诉我你们的另一半都在哪里找的?
小伙伴们,请问你们的女(男)朋友是怎么找到的?(好给后来的朋友参考啊)是交友网站,还是七大姑八大姨介绍,还是同学自然成事?春天到了,我也想拥有一段甜甜的恋爱~看看你们可怜又可爱的小师弟小师妹吧!
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细胞污染
悬浮细胞复苏后培养2.3天会出现小黑点,在倒置显微镜第四挡可见细菌在活动。采用两次离心,然后加平时双倍量的抗生素,效果不佳。实验用的东西都重新高压灭菌了,培养液也重新过滤了,个人操作也更加注意了,但仍然在复苏后出现细菌,苦恼!!!
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