关键词: 大鼠 原代细胞 足细胞
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一、培养方法
过筛:100目,150目,200目,收集200目内为小球。
1、选取100克左右取肾大鼠,无菌,去包膜,分离皮质,剪刀切成小块。
2、100目上注射器芯研磨,DMEM培养液冲洗100目网筛多遍,DMEM冲洗200目内组织。
3、离心管收集,1000转离心5分钟。
4、完全培养基重悬沉淀,接种于培养瓶或皿,一只大鼠一皿或一瓶。
5、5%CO2,37℃培养箱最内侧放置。
6、培养5天细胞换液,7天左右细胞传代。
二、培养结果
下图所示即为大鼠原代足细胞。按顺序:图1,2是培养7天传代前的图片,小球周围爬出很多细胞。图3,4是传代第二天细胞情况,过筛后仍有小的组织滤过。图5是传代7天足细胞完全分化图片。
由于本人实验刚有进展,好多图片制作不理想,后续的细胞免疫荧光坚持在做,失败过两次,出结果后再发,不过导师说了就是足细胞!
图1
图2
图3
图4
图5
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你所在的学校的补助在全国是什么水平?
还记得你在读研时,所在学校的补助是多少吗~?读博的也可以说说呀。我的好少,有点想哭。
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科研汪也想有春天:告诉我你们的另一半都在哪里找的?
小伙伴们,请问你们的女(男)朋友是怎么找到的?(好给后来的朋友参考啊)是交友网站,还是七大姑八大姨介绍,还是同学自然成事?春天到了,我也想拥有一段甜甜的恋爱~看看你们可怜又可爱的小师弟小师妹吧!
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细胞污染
悬浮细胞复苏后培养2.3天会出现小黑点,在倒置显微镜第四挡可见细菌在活动。采用两次离心,然后加平时双倍量的抗生素,效果不佳。实验用的东西都重新高压灭菌了,培养液也重新过滤了,个人操作也更加注意了,但仍然在复苏后出现细菌,苦恼!!!
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