- ￥2800 - 6200
- 上海研生
- YS-01X8098
- 国产
- 2026年01月14日
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 肿瘤类型：
否
- 供应商：
上海研生
- 库存：
30
- 生长状态：
贴壁
- 是否是肿瘤细胞：
否
- 细胞形态：
不规则 ，含足突细胞
- 物种来源：
大鼠
- 组织来源：
肾脏组织
- 规格：
5×10⁵Cells/T25培养瓶
基本信息：
细胞名称：大鼠原代肾足细胞
组织来源：肾脏组织
商品货号：YS-01X8098
种属来源：大鼠
产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶
包被条件：
培养基：原代肾足细胞培养体系
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：贴壁生长
细胞形态：不规则 ，含足突细胞
传代特性：根据细胞特性
传代比例：
消化液：0.25%胰蛋白酶
培养条件：气相：空气 ，95%； CO2 ， 5%
细胞简介：
肾小球为血液过滤器 ， 肾小球毛细血管壁构成过滤膜。 肾小球过滤膜从内到外有 三层结构： 内层为内皮、 中层为肾小球基膜、外层为上皮细胞层 ，上皮细胞又称 足细胞 ，其不规则突起称足突 ，其间有许多狭小间隙 ，血液经滤膜过滤后 ，滤液 入肾小球囊。在正常情况下 ，血液中绝大部分蛋白质不能滤过而保留于血液中 ， 仅小分子物质如尿素、葡萄糖、 电解质及某些小分子蛋白能滤过。 肾足细胞即肾 小球上皮细胞 ，它附着于肾小球基底膜的外侧 ，连同肾小球基底膜和肾小球基膜 一起构成了肾小球血液滤过屏障。又由于正常成年机体的肾脏足细胞是一种终末 分化细胞 ，体外培养的原代细胞不能增殖。足细胞呈星型多突状 ，胞体较大 ， 由 胞体伸出许多突起 ，呈指状交叉覆盖于肾小球基底膜外表面 ，并通过黏附分子和 蛋白多糖分子与肾小球基底膜相连。足细胞在正常情况下可以分泌肾小球基底膜 的主要组成成分IV型胶原和纤维连接蛋白,在促肾纤维化引资等刺激下还能分泌具 有降解肾小球基底膜作用的基质金属蛋白酶和组织蛋白酶 ，从而在肾小球基底膜 的代谢平衡中发挥重要作用。
原代细胞试用的实验类型：
原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究，如蛋白质组学、基因组学、细胞株（系）研究、DNA，RNA和遗传学研究等，还可应用于当今热门的
生物医药产业如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等。在这些应用中几乎都涉及了几个最常见的且最基础的细胞实验，如下：
一、细胞增殖检测：
常见检测方法：CCK8检测法 ，MTT检测法，Brdu检测法，Edu检测法，平板克隆形成
二、细胞周期检测
常见检测方法：流式检测细胞周期，标记有丝分裂百分率法
三、细胞凋亡检测
常见检测方法：流式检测细胞凋亡，线粒体膜电位，活性氧检测，Hoechst染色，电镜，TUNEL
四、细胞转移能力检测
常见检测方法：细胞划痕实验，Transwell实验，Invasion实验
原代细胞培养方法及注意事项：
1.准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。
3.处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污；如怀疑组织可能污染，可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。
4.剪切：用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块，以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液，然后一并倒入三角烧瓶中，结扎瓶口或塞以胶塞。
5.消化：或用恒温水浴，或置于37℃温箱消化均可，消化中每隔20分钟应摇动一次，如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6.分离：在消化过程中见消化液发混浊时，可用吸管吸出少许消化液在镜下观察，如组织已分散成细胞团或单个细胞，立即终止消化，随即通过适宜不锈钢筛，滤掉尚未充分消化开的组织块。低速（500~1000转/分）离心消化液5分钟，吸出上清，加入适量含有血清的培养液。
7.计数：用计数板计数，如细胞悬液细胞密度过大，再补加培养液调整后，分装入培养瓶中。对大多数细胞来说，pH要求在7.2~7.4范围，培养液呈微红色，如颜色偏黄，说明液体变酸，可用NaHCO3调整。
8.培养：置于36.5℃温箱培养，如用CO2温箱培养，瓶盖需拧松半圈。
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文献和实验所示即为大鼠原代足细胞。按顺序：图1，2是培养7天传代前的图片，小球周围爬出很多细胞。图3，4是传代第二天细胞情况，过筛后仍有小的组织滤过。图5是传代7天足细胞完全分化图片。 由于本人实验刚有进展，好多图片制作不理想，后续的细胞免疫荧光坚持在做，失败过两次，出结果后再发，不过导师说了就是足细胞！ 图1 图2 图3 图4 图5
的[5]，但细胞得率均较低，而近些年来国外大多数方法采用以大脑皮质为材料、酶消化及梯度离心分离脑微血管段并进行原代培养[6~9,11,12]。由于原代培养中无法避免地混杂成纤维细胞、周细胞、平滑肌细胞、星型胶质细胞等其他细胞的生长，而且工作量大、过程繁琐且费用高[1]，进行较纯的大鼠脑微血管内皮细胞原代培养一直是国内外的一个难点。 本人参照文献[6]、[7]、[8]的方法，成功地摸索出大鼠脑微血管内皮细胞分离和原代培养的方法，并获得纯度较高的脑微血管内皮细胞。 1.材料与方法 1.1 实验动物 每次
液体配制：硼酸硼砂缓冲液：0.05M四硼化钠45ml，0.2M硼酸55ml，pH8.4；胰酶－EDTA消化液：胰酶－0.125g；EDTA－0.2g；D-Hanks平衡盐液定容至100ml所用的培养板、培养瓶或玻片预先经100μg/L多聚赖氨酸硼酸盐缓冲液于37℃包被4h，三蒸水洗三遍晾干备用。操作步骤如下：1、孕16d SD大鼠经戊巴比妥钠麻醉后，碘酒、75％乙醇消毒腹部皮肤，依次剪开皮肤、肌肉、皮下筋膜，无菌操作下取出胚胎放入预冷的D-Hanks平衡盐液中。2、在解剖显微镜下分离并取出胚胎
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