实验技巧:SDS-PAGE 电泳常见问题及指南
Q:SDS-PAGE 电泳的基本原理?A:SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进 SDS(十二烷基硫酸钠), SDS 会与变性的多肽,并使蛋白带负电荷,由于多肽结合 SDS 的量几乎总是与多肽的分子量成正比而与其序列无关,因此 SDS 多肽复合物在丙稀酰胺凝胶电泳中的迁移率只与多肽的大小有关,在达到饱和的状态下,每克多肽可与 1.4 g 去污剂结合。当分子量在 15KD 到 200KD 之间时,蛋白质的迁移率和分子量的对数呈线性关系,符合下式:logMW=K ...
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过氧化物酶同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳
一、目的1、了解聚丙烯酰胺凝胶电泳原理2、了解聚丙烯酰胺凝胶的制作过程3、了解过氧化物酶同工酶电泳过程二、实验原理:1、电泳原理及影响电泳的主要因素带电粒子在电场中向与其自身带相反电荷的电极移动,这种现象称为电泳。用电泳技术分离、分析蛋白质、酶、核酸等生物大分子,有较高的分辨率,目前已成为生物科学研究中必不可少的手段之一。带电离子在电场中的泳动速度(1)和迁移率(泳动度)(2) ...
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聚丙烯酰胺凝胶电泳
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SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法—蛋白质的分子量测定
【实验目的】 1.掌握SDS—聚丙烯酰胺电泳法的原理。 2.学会用此种方法测定蛋白质的分子量。 【实验原理】 SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)是对蛋白质进行量化,比较及特性鉴定的一种经济、快速、而且可重复的方法。该法主要依据蛋白质的分子量对其进行分离。SDS与蛋白质的疏水部分相结合,破坏其折叠结构,并使其稳定地存在于一个广泛均一的溶液中。SDS&mda ...
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