关键词: PCR SSP
来源: 互联网
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简介
采用SSP进行PCR扩增后,相应的PCR产物是否出现,是HLA分型结果的判断的依据,相应SSP扩增产物出现,表示基因组中存在与特异性引物(即SSP)互补结合的DNA序列,即样本为该SSP结合的HLA基因阳性。当某种SSP引物的扩增管中未出现相应的PCR产物时,应注意观察内参照引物是否出现PCR产物。
如果该扩增管的内参照引物出现PCR产物,而无相应SSP扩增产物,说明样本为该SSP特异性扩增的HLA基因阴性;如果该扩增管中未出现内参照引物的扩增产物,则意味着PCR扩增出现问题。
1. PCR-SSP技术的原理是基于引物序列与基因组(模版)DNA的严格互补结合,因此使用的Taq多聚酶应该无3’-5’外切酶活性,否则外切酶的作用可能修正错配的引物-模版复合物,导致错配延伸,出现假阳性结果。
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电泳时条带跑出凝胶,是什么情况?不会没成功吧?
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双非博士真就如大家所说没有出路?
双非博士一枚,在老师的指导下,自己也算勤奋,发了三四篇SCI,其中有一篇顶刊,手头上还有一些工作没有处理完,本来心里有些自卑,面对现在外界所说双非博士的各种言论,导致自己有些不知所措。以后进高校,哪怕你有好文章也是会四处碰壁嘛?想问问过来人的经验。
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PCR有产物但是电泳无结果
PCR后用紫外分光测定DNA含量都在450-500ug/ul,但电泳无目的片段的条带,内参也没条带。电泳中maker能跑出条带,用引物也点了样,引物的条带稍模糊但还是有,请问是哪里出了问题?
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