RNA提取及注意事项
本文介绍了RNA的提取步骤和相关注意事项
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RNA提取的基本操作步骤
RNA的提取准备试剂：氯仿，异丙醇，75�乙醇，无RNase的水或0.5�SDS(溶液均需用DEPC处理过的水配制)操作步骤：1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎每50-100mg组织加入1ml TRIzol用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10�。b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸 ...
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总RNA的提取（Trizol法提取）
在收集到生物材料之后，最好能即可进行RNA制备工作。若需暂时储存，则应以液氮将生物材料急速冷冻后，储存于-80℃冷冻柜。在制备RNA时，将储存于冷冻柜的材料取出，立即以加入液氮研磨的方式打破细胞，不可以先行解冻，以避免RNase的作用。1. 提取组织RNA时，每50~100mg组织用1ml Trizol试剂对组织进行裂解：提取细胞RNA时，先离心沉淀细胞，每5~106个细胞加1ml Trizo ...
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动物组织RNA的提取
实验目的：掌握由动物组织中提取总RNA的方法实验原理：Trizol试剂是一个包含酚、异硫氰酸胍和SDS的单相酸性溶液，其在裂解细胞的同时抑制RNase的活性，随后加入氯仿，酚会大量的溶解在氯仿中。由于DNA和RNA在酸性酚中的溶解性不同，造成DNA分布在下层的氯仿酚溶液中，RNA则分布在上层的水相中，最后用异丙醇沉淀水相中的RNA，并用70%乙醇洗涤沉淀，这样就可以得到比较纯净的总RNA.实 ...
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