关键词: 免疫共沉淀
来源: 丁香园论坛
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woxingwosu wrote: 有几个问题需要确认一下: 1. 你做免疫共沉淀(IP)的抗体是否可以用。WEstern能识别的抗体不一定能用在IP。 2. 内源性蛋白的表达量。需要先确认一下这个蛋白的表达量,如果这个蛋白本来表达量就很低,那么做IP的难度就很大,这时候需要考虑过量表达这个蛋白了。或者需要收集大量的细胞来跑胶。 3. 银染的问题。我觉得你做IP首先要确认的是你的目的蛋白是否有被IP下来。最好用western检测一下IP沉淀中是否含有你要的内源性表达的蛋白,有的话再进一步做银染。银染的上样量可以大一些。当然我觉得可能你在IP的过程中出现问题的几率比较大。 祝好运。
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小树洞:你们工作后第一个月都得了多少工资呢?
妇产专硕18年刚毕业,四证合一。找了个市级三甲医院,合同的。工作一个月,当时发工资,968元。之前应聘的时候说前三月试用期1300 元。试用期过后加奖金,没想到,呵呵,租房一月1000元。今天直接崩溃。打算明天打电话问财务扣的都是什么钱,了解清楚后闪人。回家继承祖业—烤地瓜,烤玉米走起。你们工作后第一个月都得多少工资呢?
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抗体保存
用奶粉或者BSA配好的一抗/二抗可以在—20度保存多久?大约几个星期还是一两个月?
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DNA提取有杂带
PCR产物用试剂盒回收的时候,发现有杂带?有哪些办法可以提取得更干净?
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