凝胶迁移实验(EMSA)实验方法
凝胶迁移实验有称凝胶阻滞实验或电泳迁移率实验(EMSA,electrophoretic mobility shift assay),是一种用于蛋白与核算相互作用的技术。最初是用于转录因子与启动子相互作用的验证性实验,也可应用与蛋白-DNA、蛋白-RNA互作研究。一、实验原理EMSA主要基于蛋白-探针复合物在在凝胶电泳过程中迁移较慢的原理。根据实验设计特异性和非特异性探针,当核酸探针与样本蛋白混合孵育时,样本中可以与核酸探针 ...
来源:中帜生物 57896 阅读
GUS报告基因的定性和定量检测
一、GUS报告基因的定性检测GUS能与显色底物X-gluc 反应,显现蓝色,因而可以通过组织化学染色定性研究GUS的表达水平和表达模式。GUS 染色的稳定性好,组织定位精确,成为在植物中运用很广的报道基因。1. GUS染色底物的配制按下表1配制GUS染色的底物。表1. GUS染色底物的配制试剂名称母液浓度母 ...
来源:互联网 19351 阅读
凝胶阻滞
原理电泳迁移率分析,也可称作迁移电泳,凝胶电泳分析,凝胶迁移率分析,条带移动分析或者凝胶阻滞分析,这种方法常用来研究蛋白质-DNA,蛋白质-RNA的相互作用,对照泳道(不含蛋白质的DNA/RNA探针)将出现单一的条带。如果蛋白质与片段结合,形成大的复合物,因此在凝胶上迁移的速度慢从来迁移率减低。材料和试剂1. DTT(Promega) ...
来源:互联网 15450 阅读
浅谈一般的细胞传代方法
开始细胞传代前,仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全。细胞与试剂方面:1、细胞(单层细胞,镜检适合)2、培养液(MEM-0.2%LH 培养液或MEM 培养液或199 等适合细胞有要求的培养液)3、灭活小牛血清、庆大霉素溶液(1 万单位)4、7.5%NaHC03 溶液5、0.25%胰蛋白酶6、PBS 洗液。实验小用具方面:1、小方瓶(100m1)2、克氏瓶3、胶塞4、吸管(10ml、1m1)5、细胞吹打管(20 ml)(以上用具需经121℃至少15 分钟高压灭菌)6、 ...
来源:嘉美纽诺生物 12129 阅读