凝胶迁移实验（EMSA）实验方法
凝胶迁移实验有称凝胶阻滞实验或电泳迁移率实验（EMSA，electrophoretic mobility shift assay），是一种用于蛋白与核算相互作用的技术。最初是用于转录因子与启动子相互作用的验证性实验，也可应用与蛋白-DNA、蛋白-RNA互作研究。一、实验原理EMSA主要基于蛋白-探针复合物在在凝胶电泳过程中迁移较慢的原理。根据实验设计特异性和非特异性探针，当核酸探针与样本蛋白混合孵育时，样本中可以与核酸探针 ...
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GUS报告基因的定性和定量检测
一、GUS报告基因的定性检测GUS能与显色底物X-gluc 反应，显现蓝色，因而可以通过组织化学染色定性研究GUS的表达水平和表达模式。GUS 染色的稳定性好，组织定位精确，成为在植物中运用很广的报道基因。1. GUS染色底物的配制按下表1配制GUS染色的底物。表1. GUS染色底物的配制试剂名称母液浓度母 ...
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凝胶阻滞
原理电泳迁移率分析，也可称作迁移电泳，凝胶电泳分析，凝胶迁移率分析，条带移动分析或者凝胶阻滞分析，这种方法常用来研究蛋白质-DNA，蛋白质-RNA的相互作用，对照泳道（不含蛋白质的DNA/RNA探针）将出现单一的条带。如果蛋白质与片段结合，形成大的复合物，因此在凝胶上迁移的速度慢从来迁移率减低。材料和试剂1. DTT（Promega） ...
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浅谈一般的细胞传代方法
开始细胞传代前，仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全。细胞与试剂方面：1、细胞(单层细胞，镜检适合)2、培养液(MEM-0.2%LH 培养液或MEM 培养液或199 等适合细胞有要求的培养液)3、灭活小牛血清、庆大霉素溶液（1 万单位）4、7.5％NaHC03 溶液5、0.25％胰蛋白酶6、PBS 洗液。实验小用具方面：1、小方瓶(100m1)2、克氏瓶3、胶塞4、吸管(10ml、1m1）5、细胞吹打管（20 ml）(以上用具需经121℃至少15 分钟高压灭菌)6、 ...
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