充血通过肝窦内皮细胞中CXCL9的反向分区富集肝内巨噬细胞

背景与目的：充血改变了肝窦沿门静脉-中央静脉轴的微环境。我们研究了肝窦中免疫细胞的空间变化，这些变化导致充血性纤维化和门静脉高压（PHTN）。方法：为了可视化充血性肝病（CH）中免疫细胞的分布，我们对CH患者、Fontan相关肝病（FALD）患者和对照者的肝组织进行了成像质谱流式（IMC）。我们进行了下腔静脉部分结扎（pIVCL）以模拟小鼠CH，并分离原代肝细胞进行单细胞RNA测序（scRNA-seq）以研究肝窦内皮细胞（LSECs）的分区。在pIVCL后，小鼠接受腹腔注射AMG487（一种CXCL9受体抑制剂）或中和抗CXCL9抗体。结果：CH和FALD中肝内巨噬细胞富集。鉴于CXCL9在肝脏巨噬细胞模式形成中的作用，我们在CH中进行了RNA原位杂交（RNAish），并确定CXCL9在FALD的LSECs中高表达，提示LSECs在CH中募集巨噬细胞。pIVCL后，AMG487或抗CXCL9抗体治疗可减轻门静脉压力、纤维化和肝内巨噬细胞。为了研究促进巨噬细胞趋化的LSECs变化，我们在pIVCL和假手术后进行了scRNA-seq。分析揭示了3个根据窦状隙位置划分的LSEC亚群。RNAish鉴定出中央周围LSECs是FALD中CXCL9的主要来源。体外分析表明，β-连环蛋白和缺氧诱导因子-1α调节中央周围LSECs中的CXCL9转录。结论：来自中央周围LSECs的CXCL9在CH和FALD中富集肝内巨噬细胞，导致充血性纤维化和PHTN。靶向LSEC衍生的CXCL9的策略可能阻止CH和FALD的进展。