患者入组与基线评估
纳入难以切除的皮肤基底细胞癌患者，记录基线特征。
筛选符合条件的患者，收集临床和病理数据，专家小组确定手术必要性。
关于丁香通
公司信息
个人用户
企业机构
无忧采购 轻松科研
- 移动端
皮肤基底细胞癌新辅助治疗中Talimogene laherparepvec的疗效与耐受性：一项II期试验（NeoBCC试验）
Efficacy and tolerability of neoadjuvant therapy with Talimogene laherparepvec in cutaneous basal cell carcinoma: a phase II trial (NeoBCC trial)
实验完整度
高包含II期临床试验（疗效与安全性终点）、mIF空间分析、scRNA-seq、scTCR-seq和scBCR-seq等多层级证据，并进行了功能验证和机制验证。
主要模型
皮肤基底细胞癌患者（18例，难以切除） 肿瘤组织样本（FFPE切片用于mIF，单细胞悬液用于scRNA-seq）
重点核对
患者入组标准：≥18岁，组织学确诊的BCC，需皮肤瓣或移植才能闭合伤口 T-VEC给药方案：瘤内注射，初始剂量106 p.f.u./ml，后续剂量108 p.f.u./ml，每14天一次 主要终点：六周期T-VEC后无需整形重建手术即可切除的比例 病理反应评估：pCR vs non-pCR，由三位病理学家盲法评估 免疫分析：mIF（CD4, CD8, CD20, Foxp3, CD68, PanCK）和scRNA-seq
摘要
我们报告了一项单臂、II期新辅助试验，使用溶瘤病毒talimogene laherparepvec（T-VEC）治疗18例难以切除的皮肤基底细胞癌患者。主要终点定义为接受六周期T-VEC（13周）后，无需整形重建手术即可切除的患者比例，该终点在I期后已达到（18例中9例；50.0%）；因此研究因早期成功而提前终止。客观缓解率为55.6%，病理完全缓解率为33.3%。次要终点包括安全性、无复发生存期和总生存期、新基底细胞癌发生时间及生物学读数。仅发生轻度不良事件。6个月无复发生存率和总生存率均为100%。两名患者新发基底细胞癌。T-VEC导致肿瘤微环境中细胞毒性T细胞（P=0.0092）、B细胞（P=0.0004）和髓系细胞（P=0.0042）显著增加，调节性T细胞显著减少（P=0.0290）。总之，新辅助T-VEC为难治性基底细胞癌患者提供了一种可行的治疗选择（EudraCT编号2018-002165-19）。
实验结论
提炼研究问题、关键发现与证据，快速把握文章的核心贡献。
- 研究问题
- 新辅助T-VEC治疗能否安全有效地使难以切除的皮肤基底细胞癌变得可切除，并改善肿瘤微环境？
- 核心机制
- T-VEC治疗增加细胞毒性T细胞、B细胞和髓系细胞浸润，减少Treg细胞，并诱导IGHG1浆细胞克隆扩增，从而重塑免疫抑制性肿瘤微环境。
- 主要证据
- II期临床试验显示主要终点达成（50%），ORR 55.6%，pCR 33.3%；mIF和scRNA-seq显示免疫细胞组成显著变化。
- 研究意义
- 新辅助T-VEC为难治性BCC提供了一种可行、耐受性好的治疗选择，支持溶瘤病毒在BCC治疗中的应用。
研究路径
按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。
新辅助T-VEC治疗
评估T-VEC瘤内注射的疗效与安全性。
患者接受六周期T-VEC治疗，周期为13周，评估肿瘤面积变化和不良事件。
手术切除与病理评估
评估治疗后肿瘤是否可切除及病理缓解程度。
治疗结束后进行手术切除，评估是否需要皮瓣/移植，进行病理学检查。
安全性与随访评估
记录不良事件和复发情况。
在随访期间监测不良事件、复发、新发BCC和生存情况。
肿瘤微环境免疫分析
探究T-VEC对肿瘤免疫微环境的影响。
使用mIF和scRNA-seq分析治疗前后免疫细胞组成和空间分布。
免疫组库与克隆分析
分析T细胞和B细胞受体克隆扩增。
进行scTCR-seq和scBCR-seq，分析克隆类型和扩增程度。
研究方法
按研究目的归类文中使用的方法，便于定位所需技术。
产品清单
| 实验环节 | 名称 | 品牌 | 货号 |
|---|---|---|---|
| 多重免疫荧光 | Opal 7实体肿瘤免疫学试剂盒 | Akoya Biosciences | OP7TL4001KT |
| Vectra Polaris | Akoya Biosciences | -- | |
| inForm | Akoya Biosciences | -- | |
| HALO图像分析软件 | Indica Labs | -- | |
| DAPI | -- | -- | |
| CD138抗体 | Proteintech | 10593-1-AP | |
| IgG1抗体 | Novus Biologicals | NBP2-62028 | |
| PanCK抗体 | Novus Biologicals | NBP2-29429 | |
| 细胞解离与分选 | Miltenyi皮肤解离试剂盒 | Miltenyi | 130-101-540 |
| ACK缓冲液 | Gibco | A10492-01 | |
| CD45 PerCP-Cy5.5抗体 | BioLegend | 304027 | |
| EpCAM APC抗体 | BioLegend | 324207 | |
| FACSAria流式细胞分选仪 | BD | -- | |
| 单细胞RNA测序 | 10x Genomics 5' 试剂盒 v1.1 | 10x Genomics | -- |
| Qubit dsDNA高灵敏度试剂盒 | Invitrogen | Q33231 | |
| NovaSeq SP流动槽 | Illumina | -- |
关键环节
汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。
| 环节 | 核对要点 |
|---|---|
| 患者入组 | 年龄≥18岁，组织学确诊的BCC，需要皮肤瓣或移植才能闭合伤口，排除特定亚型 阅读提示：Methods: Patient eligibility |
| T-VEC给药 | 剂量：初始106 p.f.u./ml，后续108 p.f.u./ml；频率：每14天一次；途径：瘤内注射；周期：6次 阅读提示：Methods: Study design, treatment schedule and sample collection |
| 主要终点评估 | 六周期T-VEC后是否可切除且无需皮肤瓣/移植 阅读提示：Results: Primary end point |
| 病理反应评估 | pCR vs non-pCR，由三位病理学家盲法评估 阅读提示：Methods: Histopathologic classification and response evaluation |
| 免疫分析 | mIF panel：CD4, CD8, CD20, Foxp3, CD68, PanCK；scRNA-seq样本处理和数据分析参数 阅读提示：Methods: Multiplex immunofluorescence; Preparation of single-cell RNA sequencing libraries; Single-cell RNA sequencing analysis |