重编程胰腺导管腺癌微环境：一种新型整合素靶向细胞毒素ProAgio增强化疗疗效

背景：胰腺导管腺癌（PDAC）的生长和转移受肿瘤微环境（TME）影响，TME包括免疫细胞、内皮细胞、巨噬细胞和癌症相关成纤维细胞（CAFs）。由于新型整合素靶向细胞毒素ProAgio能够抑制活化的CAFs和内皮细胞，我们在PDAC的基因工程小鼠（GEM）和原位小鼠模型中研究了其与标准治疗化疗方案的联合应用。方法：我们建立了转移性小鼠KPC-Ganji & Bassel-Luc（mKPC-GB-Luc）细胞系，并通过bulk RNA测序进行了验证。使用两种体内原位小鼠模型评估ProAgio联合化疗。mKPC-GB-Luc用于评估5FU、奥沙利铂和伊立替康（FOI联合方案），KPC-ML1-Luc用于评估吉西他滨、白蛋白结合型紫杉醇（GPTx联合方案）。采用免疫组织化学检测整合素β3、E-cadherin和HIF-1α。使用pimonidazole评估缺氧。通过流式细胞术定量干细胞、CAFs和免疫细胞亚型。我们在KPC基因工程小鼠模型（KPC GEM）中评估了ProAgio联合吉西他滨。开发了两组KPC GEM。第一组用于生存研究。第二组提前终止，肿瘤用于单细胞RNA测序和序贯多重免疫荧光（COMET）。结果：与化疗方案（GPTx或FOI）、ProAgio或假对照相比，ProAgio联合化疗显著调节了TME，减少了肿瘤重量，减少了缺氧，并消除了向肺和肝的转移。与任一单独治疗相比，ProAgio联合吉西他滨提高了KPC GEM小鼠的总生存期。单细胞RNA测序、流式细胞术、免疫荧光、免疫组织化学和COMET分析表明，ProAgio联合化疗通过将活化的CAFs转变为qCAFs（静息CAFs）、巨噬细胞从促肿瘤向促炎极化转变，以及激活自然杀伤（NK）细胞、CD4⁺和CD8⁺ T细胞，重编程了PDAC-TME。联合治疗抑制了PDAC干性。体外经ProAgio处理的CAFs表现出甘氨酸和半胱氨酸分泌减少，这些是支持干性和肿瘤进展的重要代谢物。结论：这些结果证实了ProAgio的新型作用机制，包括减少缺氧和调节TME。当前数据为ProAgio增强化疗疗效提供了证据。