小鼠免疫与前列腺组织收集
建立C57BL/6Aire-/-小鼠前列腺慢性炎症模型并获取组织。
C57BL/6Aire-/-小鼠皮下注射前列腺匀浆蛋白和弗氏完全佐剂，10天后加强免疫，21天或35天后收集前列腺组织。
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C57BL/6Aire-/-小鼠前列腺中的免疫失调与人良性前列腺增生中所见相似
Immune dysregulation in the prostates of C57BL/6Aire-/- mice mirrors that seen in human benign prostatic hyperplasia
实验完整度
高包含小鼠模型、组织学、流式细胞术、scRNA-seq及人BPH样本比较，多层级证据并有免疫细胞和间质功能机制验证。
主要模型
C57BL/6Aire-/-小鼠前列腺 C57BL/6J野生型小鼠前列腺 人BPH患者前列腺组织样本
重点核对
C57BL/6Aire-/-小鼠8–12周龄，皮下注射200μg前列腺匀浆蛋白与弗氏完全佐剂1:1，总体积100μl，10天后以200μg前列腺匀浆蛋白与弗氏不完全佐剂1:1加强免疫，21天或35天后收集前列腺。 scRNA-seq：6只C57BL/6Aire-/-小鼠，每样本混合3只小鼠前列腺，21天样本14,935个细胞，35天样本17,149个细胞。 人BPH前列腺组织样本用于scRNA-seq和组织学比较。 流式细胞术分析C57BL/6Aire-/-、C57BL/6Aire+/-和C57BL/6Aire+/+小鼠前列腺免疫细胞组成。 组织学检测包括H&E、K8/K5 IHC、Masson三色染色和免疫荧光。
摘要
良性前列腺增生（BPH）是老年男性中最常见的泌尿系统疾病，导致显著的发病率。BPH的病因尚不清楚，尽管已知慢性前列腺炎症可促进BPH中的增生、纤维化重塑和治疗抵抗。BPH高度复杂且异质，表现为不同程度的间质和上皮增殖、纤维化、炎症以及相关的下尿路症状。这种复杂性给模型开发带来了挑战。在此，我们表征了一种Aire转录因子缺陷的非消退性（慢性）炎症模型，该模型为C57BL/6J背景，用于研究BPH中存在的前列腺炎症。这种慢性炎症模型表现出中枢耐受缺失，但保留其他方面完整且功能正常的免疫系统。C57BL/6Aire-/-小鼠皮下注射前列腺匀浆蛋白和弗氏完全佐剂，10天后加强免疫。21天和35天后，收集整个前列腺用于组织学、流式细胞术和单细胞RNA测序（scRNA-seq），然后与人BPH数据进行比较。炎症局限于C57BL/6Aire-/-小鼠的前列腺。组织学和scRNA-seq数据显示，C57BL/6Aire-/-小鼠前列腺中的主要白细胞表型是B和T淋巴细胞。C57BL/6Aire-/-小鼠前列腺中的巨噬细胞表达与一系列表型相关的特征，正如BPH中所见。我们在C57BL/6Aire-/-前列腺中鉴定出一个Trem2+巨噬细胞群体和衰老相关的Cd8+GZMK hi GZMB low T细胞，类似于人BPH中所见。此外，C57BL/6Aire-/-中的成纤维细胞簇与诊断为BPH患者前列腺中鉴定出的成纤维细胞相似，这些簇也表达与衰老相关的标志物。总体而言，C57BL/6Aire-/-小鼠前列腺中观察到的炎症和预测的白细胞-间质相互作用类似于人BPH，可能处于疾病的早期阶段，使该模型可用于研究炎症驱动的前列腺增生的影响。© 2026 The Author(s)。The Journal of Pathology由John Wiley & Sons Ltd代表大不列颠和爱尔兰病理学会出版。
实验结论
提炼研究问题、关键发现与证据，快速把握文章的核心贡献。
- 研究问题
- C57BL/6Aire-/-小鼠前列腺慢性炎症模型是否能够再现人良性前列腺增生（BPH）中的免疫失调和间质重塑特征。
- 核心机制
- Aire缺陷导致中枢耐受缺失，引发前列腺局部慢性非消退性炎症，B/T淋巴细胞和巨噬细胞浸润，伴随成纤维细胞衰老相关分泌表型和上皮-间质增生。
- 主要证据
- 组织学、流式细胞术和scRNA-seq显示C57BL/6Aire-/-小鼠前列腺中B/T淋巴细胞为主，存在Trem2+巨噬细胞、衰老相关Cd8+GZMK hi GZMB low T细胞和表达SASP标志物的成纤维细胞，与人BPH数据相似。
- 研究意义
- 该模型可用于研究慢性非消退性前列腺炎症对BPH的影响，特别是炎症驱动的上皮和间质增生，以及评估抗TNF和其他抗炎治疗。
研究路径
按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。
组织学与免疫表型分析
评估前列腺炎症细胞浸润、上皮和间质增生。
前列腺组织固定、石蜡包埋、H&E染色、免疫组化和免疫荧光检测免疫细胞标志物和上皮/间质标志物。
流式细胞术分析
量化前列腺免疫细胞组成。
消化前列腺组织为单细胞悬液，进行流式细胞术检测CD45+白细胞及其亚群。
单细胞RNA测序
解析前列腺细胞异质性和免疫细胞亚群。
前列腺组织消化后使用10x Genomics平台进行scRNA-seq，数据用Seurat分析。
人BPH数据比较
验证小鼠模型与人BPH的相似性。
将C57BL/6Aire-/-小鼠scRNA-seq数据与人BPH患者前列腺数据进行比较分析。
研究方法
按研究目的归类文中使用的方法，便于定位所需技术。
验证样本或模型特征
验证免疫效应
验证分子表达变化
产品清单
| 实验环节 | 名称 | 品牌 | 货号 |
|---|---|---|---|
| 小鼠免疫 | 弗氏完全佐剂 | Thermo Fisher Scientific | -- |
| 弗氏不完全佐剂 | Thermo Fisher Scientific | -- | |
| scRNA-seq | Chromium Next GEM单细胞3’试剂盒3.1版 | 10× Genomics | -- |
| 组织消化 | I型胶原酶 | -- | -- |
| 组织学 | BioCare抗原修复仪 | BioCare Medical | -- |
关键环节
汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。
| 环节 | 核对要点 |
|---|---|
| 小鼠免疫 | 小鼠品系、年龄、性别；免疫剂量、佐剂类型、注射体积、加强时间；组织收集时间点 阅读提示：Methods中Mice小节 |
| 组织学 | 固定液、抗原修复条件、抗体克隆号及稀释比例 阅读提示：Methods中Mouse necropsy and histology小节及Supplementary Table S1 |
| 流式细胞术 | 抗体组合、样本处理、设门策略 阅读提示：Methods中Cell flow cytometry小节及Supplementary Table S1 |
| scRNA-seq | 小鼠数量、组织混合策略、消化条件、试剂盒版本、测序深度 阅读提示：Methods中Single-cell RNA sequencing小节及Supplementary Table S2 |
| 人BPH样本比较 | 人BPH样本来源、例数、临床信息 阅读提示：Methods中Human prostate specimens小节及Results相关描述 |