胸腺基质淋巴细胞生成素驱动的B细胞过度活化损害肠上皮稳态，易导致先天性巨结肠病中的小肠结肠炎

背景与目的。先天性巨结肠相关性小肠结肠炎(HAEC)是先天性巨结肠病(HSCR)——一种高发病率的常见先天性疾病的一种致死性并发症，其发病机制尚不清楚。我们研究了异常的免疫–基质串扰如何在HSCR中驱动黏膜损伤。方法。使用人HSCR组织进行整合的单细胞RNA测序、空间转录组学、批量RNA测序和蛋白质组学。使用小鼠HSCR相关性小肠结肠炎(Ednrb−/−)模型、流式细胞术、多重免疫组织化学、体外B细胞刺激、上皮共培养、用胸腺基质淋巴细胞生成素抑制剂黄芩素进行的拯救实验以及离体肠道类器官实验进行了验证。结果。我们在HSCR节段中发现了B细胞的显著扩增和过度活化，并且这些B细胞与上皮屏障缺陷共定位。多组学分析揭示了这些初始和记忆B细胞的活化表型，其特征是B淋巴细胞激酶、B细胞连接蛋白和增殖细胞核抗原的上调，这可能有助于上皮稳态受损。至关重要的是，我们鉴定出在HSCR中富集的促纤维化胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)阳性成纤维细胞。空间定位和体外实验表明TSLP能有效激活B细胞，并与经典刺激协同增强增殖。反过来，活化的B细胞分泌促炎因子，如ICAM1和CCL5，这些因子诱导上皮细胞凋亡，抑制增殖，并破坏紧密连接——这些效应通过TSLP共刺激得以放大。活化的B细胞和上皮功能障碍在HSCR相关性小肠结肠炎(Ednrb−/−)小鼠模型中得到保守。共培养和离体类器官实验证实TSLP激活的B细胞直接破坏上皮稳态；至关重要的是，黄芩素治疗挽救了上皮增殖，减轻了凋亡，并降低了炎症相关基因的表达。结论。我们的研究揭示了一种新的致病机制，其中TSLP诱导致病性B细胞过度活化，从而破坏上皮完整性并增加对HSCR相关性小肠结肠炎的易感性。用黄芩素抑制TSLP信号可改善上皮损伤，强调这一轴是预防HSCR患者HAEC的一个有前景的治疗靶点。关键词：B细胞活化，黄芩素，小肠结肠炎，上皮失调，胸腺基质淋巴细胞生成素。