腹水通过促进ILC2富集和NK细胞功能失调状态重编程卵巢癌中的固有淋巴免疫细胞

背景：高级别浆液性卵巢癌（HGSOC）常伴有恶性腹水，这是一种临床相关的肿瘤微环境，可促进免疫逃逸、转移和治疗耐药。尽管已有关于卵巢癌中自然杀伤（NK）细胞功能障碍的描述，但腹水中更广泛的固有淋巴景观以及连接腹水来源信号与固有免疫抑制的机制仍未得到充分阐明。方法：我们对卵巢癌腹水中的NK/固有淋巴样细胞进行了单细胞RNA测序，以定义细胞异质性和分化状态。功能性检测评估了暴露于患者来源腹水（含或不含转化生长因子-β（TGF-β）受体抑制）后NK细胞的细胞毒性、脱颗粒和受体表达。利用蛋白质组学分析表征了可溶性腹水环境，并检查了固有淋巴样亚群的临床关联。结果：单细胞分析鉴定了8个转录上不同的NK/固有淋巴样细胞状态，包括细胞毒性、前体、早期样、耐受/免疫调节、调节性、促炎性和固有淋巴样细胞群。卵巢癌腹水的特征是细胞毒性和前体NK细胞状态的耗竭，同时富集了早期样、耐受性、调节性、促炎性和固有淋巴样细胞（ILC）群体。轨迹分析表明向终末分化细胞毒性NK细胞的成熟受损。值得注意的是，腹水含有扩增的程序性细胞死亡蛋白1（PD-1）+ ILC2群体，在无进展生存期较短的患者中更丰富。在功能检测中，健康供者NK细胞短期暴露于腹水抑制了脱颗粒和肿瘤细胞杀伤，降低了包括NKp30和DNAM-1在内的激活受体表达，增加了抑制性受体表达，并使NK细胞向CD56高CD16低表型转变。蛋白质组学分析支持了与2型免疫偏斜和NK细胞抑制一致的可溶性环境。重要的是，在腹水存在下，TGF-β受体抑制部分恢复了NK细胞的活化和功能。结论：HGSOC腹水建立了一个2型偏斜的免疫调节微环境，协调驱动NK细胞功能障碍和PD-1+ ILC2积累。这些发现确定了TGF-β相关的抑制和腹水相关的免疫调节因子作为恢复卵巢癌抗肿瘤免疫的候选免疫治疗靶点。