淫羊藿次苷II对放射性膀胱炎的治疗作用：利用单细胞RNA测序揭示FN1/Itgαvβ6-PI3K/AKT信号通路的机制作用

目的：放射性膀胱炎（RC）是盆腔放疗的常见并发症，以持续性膀胱炎症为特征，最终可进展为纤维化。然而，参与RC的特定细胞类型和靶向分子治疗仍知之甚少，阻碍了有效治疗策略的开发。本研究聚焦于RC的分子复杂性，旨在通过单细胞RNA测序（scRNA-seq）阐明辐射对膀胱细胞的影响，并研究淫羊藿次苷II（ICA II）在RC治疗中的保护作用及其潜在机制。材料与方法：建立大鼠RC模型，并进行单细胞RNA测序以分析辐射对不同膀胱细胞类型的分子影响。进行细胞间通讯分析以识别参与RC进展的关键信号通路。通过体外实验验证scRNA-seq的发现。此外，使用免疫共沉淀和分子动力学（MD）模拟评估ICA II对纤连蛋白1（FN1）与整合素αvβ6（Itgαvβ6）结合亲和力的影响。结果：scRNA-seq分析显示膀胱内存在16种不同的细胞类型，包括上皮细胞、成纤维细胞、平滑肌细胞、内皮细胞和免疫细胞，揭示了RC中显著的细胞异质性。细胞间通讯分析显示，辐射暴露后FN1表达显著上调。FN1与其受体Itgαvβ6结合，激活PI3K/AKT信号通路并促进纤维化。MD模拟和体外实验进一步证实，ICA II能有效破坏FN1-Itgαvβ6相互作用，抑制PI3K/AKT通路的激活，并下调与纤维化和上皮间质转化（EMT）相关的标志物。结论：本研究确定FN1-Itgαvβ6相互作用是RC纤维化的关键驱动因素。这些发现表明，ICA II可能通过靶向FN1/Itgαvβ6-PI3K/AKT信号轴来减轻纤维化进展，从而成为RC的有前景的治疗剂。