SPARC 通过 β-catenin 核转位和 c-Met 激活促进角膜上皮伤口愈合

目的：旨在研究富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白（SPARC）通过 β-catenin/c-Met 信号通路促进角膜上皮伤口愈合的分子机制。方法：使用野生型 C57BL/6 小鼠、Sparc−/− 小鼠和人角膜上皮细胞（HCECs）。通过荧光素钠染色、苏木精-伊红染色、EdU 掺入和 Cell Counting Kit-8 实验评估角膜上皮修复。通过定量 RT-PCR、免疫荧光、Western blotting 和流式细胞术评估 SPARC 和通路相关的变化。通过免疫共沉淀分析 β-catenin–c-Met 相互作用。基于串联质谱标签的磷酸化蛋白质组学比较了对照组和外源性 SPARC 处理组之间的磷酸化谱。结果：体内和体外分析表明，SPARC 促进角膜上皮伤口愈合。SPARC 缺乏延迟了上皮闭合，减少了上皮厚度，并损害了上皮-基质粘附，而外源性 SPARC 部分挽救了这些缺陷。在 HCECs 中，SPARC 敲低减少了细胞增殖和迁移。机制上，SPARC 缺失降低了 β-catenin 的表达和核转位，下调了 c-Myc，并降低了 c-Met mRNA 表达、总蛋白丰度和磷酸化。沉默 β-catenin 或 Met 损害了上皮修复，而外源性 SPARC 或通路激动剂部分恢复了这些表型。免疫共沉淀进一步表明，SPARC 缺乏减弱了 β-catenin 和 c-Met 之间的相互作用。结论：SPARC 通过增强 β-catenin 核转位和 c-Met 激活，从而促进上皮增殖和迁移，促进角膜上皮伤口愈合。SPARC–β-catenin–c-Met 轴可能代表角膜上皮损伤的治疗靶点。