侗药马登矮中的坡模酸通过抑制NF-κB信号通路激活抑制TNF-α诱导的RA-HFLS炎症反应

目的：本研究旨在探讨坡模酸（PA）是否通过抑制肿瘤坏死因子-α（TNF-α）诱导的人风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞（RA-HFLS）模型中核因子-κB（NF-κB）通路激活来抑制炎症细胞因子表达。方法：采用高效液相色谱法（HPLC）定量分析不同产地和采收年份的MDA中PA含量；采用网络分析作为假设生成工具预测潜在靶点和通路，随后通过分子对接验证PA与NF-κB通路核心靶点的结合亲和力，并通过ADMET预测评估其药代动力学特性和安全性。通过TNF-α诱导建立RA-HFLS炎症模型。使用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）和酶联免疫吸附试验（ELISA）评估细胞活力和炎症细胞因子分泌。分别通过Western blot和逆转录定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测NF-κB信号通路激活和下游基因表达。结果：HPLC分析显示，2019年采自贵州的MDA样品中PA含量最高（0.1117 mg/g）。网络分析预测NF-κB信号通路是PA潜在抗炎作用的候选机制。分子对接显示PA与IKKβ、p65和IκBα稳定结合，而ADMET预测表明其具有较好的肠道吸收、低药物相互作用风险和良好的遗传安全性，但存在潜在的肝毒性和生殖毒性风险。在TNF-α诱导的RA-HFLS模型中，PA剂量依赖性地抑制异常细胞增殖，并显著降低促炎细胞因子TNF-α和白细胞介素-6（IL-6）的分泌。机制研究表明，PA抑制NF-κB信号通路激活，从而下调IL-6、TNF-α和白细胞介素-1β（IL-1β）等炎症基因的mRNA表达。结论：PA是侗药MDA的一种生物活性代谢物，可能通过抑制NF-κB信号通路激活，下调TNF-α诱导的RA-HFLS中炎症细胞因子表达，显示出其体外抗炎潜力。