小分子脱氧尼博醌触发Keap1 Kelch结构域Cys489的烷基化和泛素化，激活Nrf2并用于炎症治疗

通过Kelch样ECH相关蛋白1（Keap1）烷基化激活核因子红细胞2相关因子2（Nrf2）在抗炎治疗中发挥核心作用。然而，通过烷基化Keap1-Kelch结构域激活Nrf2的激活剂尚未被发现。脱氧尼博醌（DNQ）是一种从海洋放线菌中发现的新型天然小分子。本研究旨在探究DNQ通过烷基化Keap1的抗炎作用及分子机制。DNQ在体内外均表现出显著的抗炎特性。通过DNQ与N-乙酰半胱氨酸的化学反应，确定DNQ抗炎活性的药效团为α,β-不饱和酰胺部分。DNQ通过激活Nrf2/ARE通路发挥抗炎作用。Keap1被证明是DNQ的直接靶点，并通过涉及烷基化的共轭加成反应与DNQ结合。通过合成的探针结合液相色谱-串联质谱法阐明了DNQ在Keap1上激活Nrf2的特定烷基化位点。DNQ通过烷基化Keap1-Kelch结构域上的半胱氨酸残基489（Cys489），触发Keap1的泛素化及随后的降解，最终使得Nrf2激活。我们的研究结果表明，DNQ通过α,β-不饱和酰胺活性基团特异性地激活Nrf2信号通路，该通路通过烷基化/泛素化Keap1-Kelch结构域发挥作用，从而展现出强效的抗炎能力，提示靶向Keap1-Kelch结构域Cys489的DNQ样小分子在炎症治疗中的潜在价值。