网络药理学与实验验证探究 Kakkalide 改善内皮细胞功能障碍和炎症反应

背景：脓毒症因其有害影响和高死亡率仍然是一个重大挑战。保护内皮功能和减轻过度炎症反应是降低死亡风险的关键。葛花是 Pueraria montana var. lobata (Willd) 的花。据《闽南本草》记载，葛花可改善恶寒高热，并具有清热泻肺的作用。最近的研究表明其具有治疗炎症性疾病的潜在功效。然而，其确切的作用机制仍有待阐明。目的：本研究旨在鉴定葛花治疗脓毒症的关键活性化合物及其药理靶点。方法：通过网络药理学分析确定葛花抗脓毒症的潜在靶点。采用盲肠结扎穿刺（CLP）小鼠模型，通过ELISA和H&E染色评估存活率、炎症和组织损伤。通过Transwell实验、免疫荧光（IF）和流式细胞术评估人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的保护作用。通过分子对接和Western blot（WB）确认关键信号通路靶点。结果：在20 mg/kg剂量下，葛花来源的化合物Kakkalide显著降低了死亡率、血清炎症因子水平，同时保护了肺和肾组织。体外实验进一步表明，在HUVEC中用5 μM Kakkalide处理可降低炎症因子、活性氧和细胞凋亡，同时促进细胞迁移和增殖。上述效应与肿瘤坏死因子（TNF）、细胞外调节蛋白激酶（ERK）和蛋白激酶B（AKT）的磷酸化水平改变有关。结论：我们的研究表明，Kakkalide作为葛花的主要成分，提高了CLP小鼠的存活率，并保护了脂多糖（LPS）刺激的HUVEC功能。本研究为Kakkalide在脓毒症中的作用和分子机制提供了新的视角。