骨髓间充质干细胞外泌体FOXL1激活METTL3/ATXN2L通路改善高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞损伤

背景：骨髓间充质干细胞（BMSCs）及其分泌的外泌体已被证明在包括糖尿病视网膜病变（DR）在内的多种疾病中具有治疗潜力。视网膜微血管内皮细胞（RMEC）损伤是DR的关键因素，了解其潜在分子机制对DR的治疗至关重要。本研究探讨了MSC来源外泌体在RMEC损伤中的作用及其潜在机制。方法：将人视网膜微血管内皮细胞（HRMECs）暴露于高糖（HG）以建立体外DR模型。使用差速离心法从BMSCs中分离外泌体，并与HRMECs共孵育进行功能研究。通过实时荧光定量聚合酶链反应评估ataxin 2 like（ATXN2L）、甲基转移酶样3（METTL3）和叉头框蛋白L1（FOXL1）的mRNA表达。通过蛋白质印迹法评估蛋白表达。使用细胞计数试剂盒-8测定细胞活力，并通过酶联免疫吸附测定分析促炎细胞因子（TNF-α、IL-1β和IL-6）。通过流式细胞术分析细胞凋亡。分别通过比色法和荧光显微镜测定MDA水平、GSH-Px活性和ROS水平。使用双荧光素酶报告基因实验和RNA免疫沉淀实验研究METTL3与ATXN2L和FOXL1的关联。结果：高糖处理增加了HRMECs中促炎因子的分泌、凋亡率和氧化应激。BMSC来源的外泌体通过将FOXL1转移到HRMECs中抑制了炎症、凋亡和氧化应激。FOXL1作为METTL3的RNA结合蛋白，通过m6A甲基化稳定了HRMECs中ATXN2L mRNA的表达。ATXN2L在DR患者血清和高糖处理的HRMECs中表达降低。ATXN2L的过表达减轻了高糖诱导的HRMECs炎症、凋亡和氧化应激。结论：BMSC来源的外泌体FOXL1稳定了METTL3以增加ATXN2L的表达，从而对高糖诱导的HRMECs损伤提供保护作用。这一发现对DR靶向治疗的发展具有临床意义。