Gasdermin D可能在脑实质梗死核心中丢失，以及解毒活血汤对卒中后焦亡-自噬抑制的作用

背景：中药解毒活血汤（JDHXD）用于减轻脑缺血（CI）中的神经炎症。我们前期的研究已证实JDHXD可以抑制CI中的小胶质细胞焦亡。然而，JDHXD减轻神经炎症和焦亡的药理机制需要进一步阐明。新的研究指出，自噬与炎症小体NLRP3之间存在相互作用，自噬可以帮助清除NLRP3。NLRP3是焦亡和自噬的关键启动因子。JDHXD通过促进自噬清除NLRP3来抑制焦亡，对脑缺血再灌注炎症损伤的作用目前尚不清楚。我们推测JDHXD可以通过促进自噬清除NLRP3来抑制CI中的焦亡。方法：采用LC-MS对JDHXD进行化学成分表征。在SD大鼠中建立大脑中动脉闭塞/再灌注（MCAO/R）模型。评估神经功能缺损、神经元损伤和脑梗死体积。采用Western Blot和免疫荧光检测神经元焦亡和自噬。结果：经LC-MS分析，在JDHXD含药血清中鉴定出30种可能的物质代谢物（综合评分>0.98）。此外，JDHXD在CI后保护大鼠神经功能和脑梗死面积。JDHXD抑制CI后焦亡和自噬的表达。我们的Western blot和免疫荧光结果显示，JDHXD处理可以降低自噬相关因子ULK1、beclin1和LC3-Ⅱ的表达。JDHXD组NLRP3蛋白的表达低于I/R组。与I/R组相比，JDHXD组焦亡相关因子caspase-1 P10、GSDMD-NT、IL-18和IL-1β的表达降低。此外，我们观察到一个意外的结果：免疫荧光显示Gasdermin D（GSDMD）在梗死核心显著缺失，而在梗死周围和对侧大脑半球高表达。这一发现挑战了GSDMD在缺血大脑半球升高的普遍观点。结论：JDHXD在MCAO/R后抑制焦亡和自噬。JDHXD通过抑制NLRP3抑制焦亡和自噬，从而减轻CI。此外，我们提出了与以往研究不同的观察结果，即在CI第3天，梗死核心中GSDMD的表达低于梗死周围和对侧非缺血半球。