增加的刚度下调在三维自组装肽支架中培养的胰腺癌细胞中黏着斑激酶的表达

黏着斑激酶（FAK）是一种非受体酪氨酸激酶，参与整合素介导的信号转导，并有助于多种生物过程，如细胞迁移、存活、增殖和血管生成。此外，FAK可通过在Y397位点的自磷酸化被激活，并在响应细胞外基质刚度增加时触发不同的信号通路。另外，FAK在许多上皮癌中过表达和/或过度激活，其表达与肿瘤恶性程度和侵袭潜能相关。实体瘤的特征之一是ECM成分过度沉积，这产生了一个僵硬的微环境，促进持续细胞增殖和存活等。因此，研究人员越来越多地开发细胞培养模型来模拟与这类肿瘤相关的刚度增加。在本工作中，我们开发了一种新的3D体外模型，用于研究基质刚度对胰腺导管腺癌（PDAC）细胞的影响，因为这类肿瘤的特征是具有促结缔组织增生性间质，与其正常对应组织相比刚度增加。为此，我们使用了合成自组装肽纳米纤维基质RAD16-I，它在体外不会发生显著降解，从而允许在培养时间内维持相同的局部刚度。我们表明，在合成的3D RAD16-I凝胶中，基质刚度增加促进了所有分析细胞系中FAK在蛋白水平的下调，但在I型胶原支架中则不然。此外，尽管经典上已描述刚性3D基质促进pFAKY397/FAK蛋白增加，但我们发现该比率在软和刚性RAD16-I凝胶中具有细胞类型依赖性。这项研究强调了细胞对基质刚度增加的反应在很大程度上取决于用于3D培养的基质的性质。