E0703靶向ERβ促进GLI3上调，从而减轻辐射诱导的淋巴细胞DNA损伤

背景：恶性肿瘤的放射治疗和与辐射相关的诊断会损伤淋巴细胞，这不可避免地抑制免疫并导致不良临床结局。然而，很少有药物被美国食品药品监督管理局（FDA）批准用于减轻辐射引起的损伤。在此，研究了从雌二醇优化而来的新型甾体化合物（E0703）的辐射防护作用及其潜在机制。方法：小鼠暴露于γ射线辐射以建立辐射损伤的体内模型，并采用人外周血B淋巴细胞（AHH-1）研究淋巴细胞损伤。通过蛋白质印迹和免疫荧光检测细胞和组织样本中蛋白质水平的变化。通过彗星实验和γH2AX染色评估DNA损伤。使用RNA测序筛选介导E0703辐射防护作用的关键基因。为了确定E0703的直接靶点，采用了细胞热位移分析（CETSA）、药物亲和响应靶标稳定性（DARTS）、分子对接和表面等离子体共振（SPR）分析。通过染色质免疫沉淀（ChIP）分析确定雌激素受体β（ERβ）对GLI3的转录激活，同时通过免疫共沉淀（Co-IP）检测蛋白质相互作用。对IP产物进行无标记蛋白质组学分析以筛选GLI3结合物。结果：E0703显著改善了受辐射损伤小鼠的存活率和组织损伤。在淋巴细胞中，辐射诱导的DNA损伤以共济失调-毛细血管扩张突变蛋白（ATM）-检查点激酶2（CHK2）依赖性方式被E0703改善。ERβ而非ERα是E0703的直接靶点，其中E0703触发ERβ对GLI3启动子区域的增强作用可维持其蛋白质表达。E0703促进的GLI3与eIF4G1之间的相互作用对于eIF4F翻译起始复合物的形成至关重要。eIF4F的组装对于刺激参与DNA损伤修复的ATM-CHK2信号传导是必不可少的。结论：E0703通过选择性靶向ERβ减轻了辐射诱导的淋巴细胞DNA损伤。以GLI3依赖性方式形成eIF4F复合物对于E0703触发的ATM-CHK2激活至关重要。我们的研究为减轻接受放疗或辐射相关诊断的个体的辐射诱导淋巴细胞减少症提供了一种替代对策。