CDCP1敲低通过抑制PDGFRβ内吞作用来抑制PDGFRβ/AKT通路介导的血管平滑肌细胞增殖。

含CUB结构域蛋白1（CDCP1）是一种细胞表面糖蛋白，已被鉴定为能够调节细胞锚定、迁移、增殖和分化。然而，CDCP1在内膜增生中的作用，特别是对血管平滑肌细胞（VSMC）增殖和迁移的作用，尚不清楚。在本研究中，我们通过体内局灶性颈动脉狭窄模型分析了CDCP1在内膜增生中的表达。在体外，我们培养了小鼠VSMC，并用20 ng/mL血小板衍生生长因子BB（PDGF-BB）刺激24小时。采用Western blot检测细胞中CDCP1的表达。接下来，我们在VSMC中敲低CDCP1的表达，并使用CCK8实验、EDU+实验和伤口愈合实验评估其对细胞增殖和迁移的影响。然后，我们对CDCP1敲低的VSMC进行了RNA-Seq分析。基于测序结果，我们利用Western blotting研究了CDCP1敲低对AKT信号通路的影响。此外，我们通过免疫荧光和免疫共沉淀实验验证了血小板衍生生长因子受体（PDGFR）β与NEDD4、网格蛋白和Rab5之间的相互作用。结果发现，在体内内膜增生组织中CDCP1水平被激活。CDCP1敲低显著减弱了体外PDGF-BB诱导的小鼠VSMC增殖和迁移。基于RNA测序获得的差异表达蛋白的基因本体论（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析，我们发现CDCP1的敲低与“PI3K-AKT信号通路”、“泛素介导的蛋白水解”和“内吞作用”通路相关。随后的实验表明，CDCP1敲低抑制了AKT信号通路。CDCP1敲低促进了PDGFRβ与NEDD4的结合以及PDGFRβ的泛素化。此外，CDCP1敲低减弱了PDGFRβ与网格蛋白和Rab5的结合。这些数据表明，CDCP1的缺失可能增强PDGFR与NEDD4的结合并促进PDGFR的泛素化，从而调节AKT信号通路和内膜增生。