A375黑色素瘤衍生的乳酸通过TCA循环和TGF-β信号诱导巨噬细胞M2极化，从而控制A375黑色素瘤表型

摘要：引言：巨噬细胞表型与皮肤黑色素瘤的进展和预后有关。然而，A375黑色素瘤中的Warburg效应与巨噬细胞极化之间的关联及其潜在机制仍鲜有报道。目的：本研究旨在探讨A375黑色素瘤衍生的乳酸对巨噬细胞极化、黑色素瘤表型反应及其潜在机制的影响。方法：采用流式细胞术评估M1和M2标志物的表达、细胞周期和凋亡。用酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒测定转化生长因子β（TGF-β）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）的水平。分别采用CCK8和transwell实验评估增殖和侵袭。使用XF96细胞外通量分析仪分析细胞外酸化率（ECAR）和耗氧率（OCR）。蛋白表达通过Western blotting测定。结果：我们的结果显示，黑色素瘤A375条件培养基（A375-CM）诱导外周血单个核细胞（PBMCs）向抗炎M2巨噬细胞极化。M2标志物CD206和ARG1表达增加，TGF-β分泌也增加。相反，M1标志物CD68表达下降。此外，缺氧促进了A375-CM诱导的巨噬细胞M2极化。PIG1条件培养基（PIG1-CM）中乳酸水平升高诱导M2极化，而乳酸转运抑制剂AZD3965在A375-CM培养的PBMCs中抑制了这种效应。此外，黑色素瘤衍生的乳酸通过三羧酸（TCA）循环而非糖酵解调节M1/M2极化。重要的是，极化的巨噬细胞通过TCA循环和TGF-β改变了黑色素瘤的表型，包括增殖、克隆形成、细胞周期、凋亡、迁移和侵袭。结论：我们的数据共同表明，黑色素瘤衍生的乳酸促进M2巨噬细胞极化，随后通过TCA循环和TGF-β信号导致黑色素瘤表型的改变。关键词：乳酸，巨噬细胞，黑色素瘤，M2极化，TCA循环，TGF-β