microRNA-124-3p靶向calpain-1影响椎间盘髓核细胞功能的机制

椎间盘退变（IVDD）是腰痛的主要原因，其患病率随年龄增长而升高。本研究探讨了microRNA（miR）-124-3p通过靶向calpain-1（CAPN1）调节髓核细胞（NPCs）功能的机制。体外培养大鼠IVD NPCs，并转染miR-124-3p模拟物、miR-124-3p抑制剂、oe-CAPN1及其阴性对照。通过RT-qPCR评估miR-124-3p和CAPN1的mRNA水平。通过CCK-8、流式细胞术和Transwell实验评估细胞增殖、凋亡和迁移。通过Western blot检测CAPN1蛋白、凋亡相关蛋白（BAX、Cleaved-Caspase3、BCL-2）和细胞外基质（ECM）蛋白（Collagen II、Aggrecan、Fibronectin、Collagen I、基质金属蛋白酶[MMP]-13）的水平。通过双荧光素酶实验验证miR-124-3p与CAPN1的靶向结合关系。miR-124-3p过表达促进NPC功能并维持ECM稳态，表现为NPC增殖和迁移增加、凋亡减少、凋亡相关蛋白BCL-2水平升高、BAX和Cleaved-Caspase3水平降低、ECM稳态相关因子Collagen I和MMP-13蛋白水平降低，以及Collagen II、Aggrecan和Fibronectin蛋白水平升高。相反，miR-124-3p敲低则产生相反结果。miR-124-3p靶向CAPN1。此外，CAPN1的过表达部分逆转了miR-124-3p对NPCs中ECM稳态、增殖和迁移的调节作用，并促进凋亡。miR-124-3p通过抑制CAPN1表达促进IVD NPCs的增殖和迁移，并减少其凋亡，从而调节ECM稳态并维持IVD NPCs的功能。