通过高保真Cas13d介导的RNA干扰靶向抑制PLK1通过TGF-β/Smad3信号通路减轻骨肉瘤进展

骨肉瘤是儿童和青少年中最常见的原发性恶性骨肿瘤。PLK1的过表达在骨肉瘤中频繁发生，并驱动疾病进展和转移，使其成为一个有前景的治疗靶点。在本研究中，我们探讨了使用高保真Cas13d（hfCas13d）介导的RNA干扰在骨肉瘤细胞中敲低PLK1。结果显示，PLK1在骨肉瘤肿瘤组织中显著上调。通过hfCas13d转染介导的PLK1抑制抑制了骨肉瘤细胞增殖，诱导G2/M期细胞周期阻滞，促进凋亡，降低细胞侵袭并增加上皮标志物E-钙黏蛋白的表达。通过TurboID邻近标记结合免疫共沉淀鉴定出PLK1与Smad3的新相互作用，Smad3是TGF-β信号传导的关键细胞内转导因子。PLK1敲低削弱了Smad2/3磷酸化，并调节TGF-β/Smad3通路失活。最后，在体内递送靶向PLK1的hfCas13d载体显著减弱了裸鼠中骨肉瘤异种移植瘤的生长。总之，本研究强调PLK1是骨肉瘤中一个潜在的治疗靶点和疾病进展驱动因素。它也证明了hfCas13d介导的基因敲低作为靶向治疗策略的实用性。进一步优化PLK1抑制方法可能会最终改善骨肉瘤患者的临床结局。