ZNF692通过TNK2介导的MEK/ERK通路激活促进骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭

背景：骨肉瘤是一种多样且侵袭性的骨肿瘤。调控骨肉瘤发生和发展的驱动基因尚未完全明确。锌指蛋白692（ZNF692）是一种Krüppel C2H2锌指转录因子，在不同类型的恶性肿瘤中表现出异常表达，并与患者的临床预后及癌细胞的侵袭特性相关。然而，其在骨肉瘤中的具体作用仍不清楚。方法：我们通过生物信息学方法和实验验证研究了ZNF692在骨肉瘤中的异常表达及其临床意义。进行了一系列体外实验，包括CCK-8、集落形成、EdU掺入、伤口愈合和transwell侵袭实验，以评估ZNF692对骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响。建立异种移植小鼠模型以评估ZNF692在体内对肿瘤生长的影响。使用Western blot检测经基因修饰降低或升高ZNF692表达的细胞中MEK1/2、P-MEK1/2、ERK1/2和P-ERK1/2的蛋白水平。通过qRT-PCR、染色质免疫沉淀和荧光素酶报告基因实验验证了ZNF692与酪氨酸激酶非受体2（TNK2）之间的关系。结果：ZNF692在人类骨肉瘤组织和细胞系中表达均升高。此外，ZNF692的表达可作为骨肉瘤的独立预测性生物标志物。生存分析结果表明，ZNF692高表达与较差预后相关。下调ZNF692抑制骨肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭，而上调ZNF692则产生相反的影响。Western blot分析表明，减少ZNF692会降低MEK1/2和ERK1/2的磷酸化，而增加ZNF692表达则增强其磷酸化。U0126（一种特异性靶向MEK/ERK信号通路的强效抑制剂）部分抵消了ZNF692过表达对骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响。此外，ZNF692特异性结合TNK2的启动子区域并刺激骨肉瘤细胞中TNK2的转录。强制表达TNK2减弱了ZNF692敲低对P-MEK1/2和P-ERK1/2的抑制作用。类似地，部分抑制TNK2抵消了ZNF692过表达对MEK1/2和ERK1/2磷酸化的增强作用。功能测试表明，当TNK2过表达时，ZNF692敲低对细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用大大减弱。相反，TNK2的减少阻碍了ZNF692过表达增强细胞增殖、迁移和侵袭的能力。结论：ZNF692通过TNK2依赖性刺激MEK/ERK信号通路促进骨肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭。ZNF692-TNK2轴可能作为骨肉瘤潜在的预测性生物标志物和有前景的新型治疗靶点。