维拉帕米对H1N1流感病毒感染的药物再利用：网络药理学与实验验证揭示的多靶点策略

甲型流感病毒（IAV）感染构成重大公共卫生威胁。严重的流感病毒感染可诱发强烈的炎症反应和肺损伤，导致严重临床症状甚至死亡。目前抗流感药物的效用常受到副作用和耐药株出现的限制。基于L型电压门控钙通道（L-VGCCs）在流感病毒复制中的关键作用，本研究探讨了经典L型钙通道拮抗剂维拉帕米对H1N1-UI182病毒的抗病毒活性及机制。维拉帕米是一种L型钙通道阻滞剂，广泛用于心血管疾病的治疗，且安全性良好。通过分子动力学（MD）模拟和网络药理学分析，我们预测了维拉帕米与靶蛋白（PDB id：6JPA）的稳定结合模式及其潜在的多靶点网络。在体外，维拉帕米在MDCK细胞中对H1N1-UI182表现出抗病毒活性，提高了感染细胞的存活率并降低了病毒核蛋白（NP）表达。在致死性H1N1-UI182感染小鼠模型中，维拉帕米治疗显著提高了存活率，减轻了体重下降和肺部病理损伤，表现出剂量依赖性的保护作用。肺组织分析显示，维拉帕米有效降低了肺指数和病毒载量，抑制了核因子kappa B（NF-κB）信号通路的激活，并降低了关键炎症因子的表达，从而减轻了细胞因子风暴。给药方案比较表明，预治疗可获得最佳疗效，提示维拉帕米主要在病毒生命周期的早期阶段发挥作用。本研究系统阐明维拉帕米通过调节NF-κB通路发挥抗病毒和免疫调节作用。网络药理学分析提示多个靶点和通路的潜在参与，包括EGFR、SRC和磷脂酶D信号通路，为未来机制研究提供了假说。本文支持针对耐药流感病毒的药物再利用策略，并强调其临床转化的巨大潜力。