归肾丸通过抑制TNF-α介导的炎症和恢复PI3K/Akt信号通路改善PCOS样细胞表型

背景：多囊卵巢综合征（PCOS）与慢性低度炎症和胰岛素信号失调有关。归肾丸（GSW）是一种传统中药方剂，经验性地用于卵巢功能障碍，但其分子基础尚未完全明确。本研究旨在阐明GSW在代谢应激下PCOS相关颗粒细胞模型中调节炎症相关胰岛素信号的机制，重点关注TNF-α/PI3K/Akt轴。方法：基于UPLC–MS/MS鉴定的血清吸收成分的网络药理学与体外验证相结合，使用地塞米松和胰岛素刺激的人KGN细胞模拟选定的PCOS相关细胞表型。评估了GSW含药血清对细胞活力、凋亡、激素相关读数和炎症细胞因子产生的影响。通过Western blot检测PI3K/Akt信号，并进行重组TNF-α拯救实验以探讨机制依赖性。进一步评估了候选成分（embelin和nobiletin）的作用。结果：网络药理学强调TNF和PI3K/Akt信号是关键通路。在KGN代谢应激模型中，GSW含药血清剂量依赖性地提高细胞活力，减少凋亡，并减弱炎症细胞因子的输出（TNF-α和IL-6），同时伴随PI3K和Akt磷酸化增加。重组TNF-α显著削弱了GSW的保护和信号激活作用，支持TNF-α相关机制。Embelin和nobiletin再现了关键的抗炎和信号效应，并且它们的联合应用在测试浓度下产生增强的联合效应。结论：这些发现表明，GSW通过抑制TNF-α相关的炎症信号，从而解除对PI3K/Akt通路的抑制，减轻代谢应激下PCOS样颗粒细胞功能障碍。鉴于体外研究范围和含药血清方法，结果应解释为机制见解而非临床疗效的直接证据，并为后续体内验证提供了依据。