低温机械灌注通过KLF2-NLRP3信号增强巨噬细胞胞葬作用保护DCD供肝免受缺血再灌注损伤

循环死亡后捐献（DCD）是肝移植物的关键来源，但与脑死亡后捐献相比，其缺血再灌注损伤（IRI）更严重，移植结局较差。低温机械灌注（HMP）有效减轻DCD移植物损伤，但其保护性分子机制仍不清楚。 Kruppel样因子2（KLF2）是一种由血流动力学机械刺激诱导的内皮保护性转录因子。然而，KLF2在DCD肝脏HMP期间IRI中的作用尚不清楚。采用DCD建模后接受静态冷保存（CS）或HMP的大鼠肝脏，评估KLF2表达和巨噬细胞胞葬作用。通过血清谷丙转氨酶/谷草转氨酶水平、组织学、TUNEL凋亡分析和免疫荧光（IF）评估原位胞葬作用来评估损伤。通过蛋白质印迹、免疫组织化学和IF分析蛋白质标志物。在体外，对人脐静脉内皮细胞和巨噬细胞进行模拟CS/再灌注处理。使用荧光标记的凋亡Jurkat细胞定量巨噬细胞胞葬作用。通过RNA测序和免疫共沉淀探索机制。与CS组相比，HMP减少了DCD肝损伤中的病理损伤、凋亡和炎症。KLF2表达上调。然而，敲低KLF2在体外消除了这些内皮保护作用。此外，KLF2过表达增强巨噬细胞胞葬作用，而抑制KLF2则损害之。此外，增强的胞葬作用有助于炎症消退，最终改善整体移植物损伤并减少凋亡。机制上，KLF2抑制NOD样受体蛋白3（NLRP3）炎症小体以抑制焦亡，从而间接增强胞葬作用。HMP通过上调内皮KLF2减轻DCD肝移植物的IRI，KLF2抑制NLRP3炎症小体介导的焦亡，从而改善炎症微环境并促进巨噬细胞胞葬作用。