通过FDA批准药物库筛选鉴定出的金诺芬通过溶酶体损伤抑制HBs抗原分泌

背景与目的：乙型肝炎表面抗原（HBsAg）与肝细胞癌风险和免疫耗竭相关，并导致乙型肝炎病毒（HBV）持续感染。目前抗HBV治疗降低HBsAg水平的能力有限。本研究旨在鉴定能够降低HBsAg水平的FDA批准药物，并探讨其潜在机制。方法：使用含有整合HBV基因组的HepG2.2.15.7细胞，以9.9 μM浓度筛选1134种FDA批准化合物7天。检测上清液中的HBsAg和细胞活力。排除细胞活力降低超过1个标准差的化合物。选择HBsAg浓度降低超过1.5个标准差的化合物，并在0.5和5 μM浓度下进行验证。我们使用源自嵌合TK-NOG小鼠的HBV感染原代人肝细胞（HepaSH细胞）评估最终候选化合物的HBsAg降低效果，并研究了HBsAg降低的潜在机制。结果：排除126种细胞毒性化合物后，6种候选化合物的HBsAg水平降低超过1.5个标准差。依沙吖啶和金诺芬在5和0.5 μM浓度下均显著降低HBsAg水平。在HepaSH细胞中，仅金诺芬降低HBsAg水平。金诺芬不影响HBe抗原、HBV-DNA或前基因组RNA，也未降低细胞内HBsAg水平（通过Western blotting检测）。透射电子显微镜显示，金诺芬处理的HepaSH细胞比对照细胞含有更多囊泡。免疫荧光分析显示，与未处理对照相比，金诺芬处理的HepaSH细胞中Galectin-3表达增加，并且HBsAg与Galectin-3共定位，与溶酶体损伤一致。结论：金诺芬是一种FDA批准的抗风湿药物，通过溶酶体损伤减少HBsAg分泌。