FKBP5-CCL5相互作用通过调控MAPK通路和增强NET形成促进缺血性卒中中的神经炎症和神经元凋亡

背景：缺血性卒中的病理生理机制尚未完全阐明。已发现脑缺血/再灌注损伤中FKBP5的上调与缺血和再灌注损伤的严重程度相关。然而，其在缺血性卒中进展中的具体作用仍不清楚。方法：本研究共纳入40名缺血性卒中患者和40名年龄和性别匹配的健康供者（HDs），以评估FKBP5的表达、中性粒细胞胞外陷阱（NET）的形成以及NET与卒中的相关性。此外，采用短暂大脑中动脉闭塞（tMCAO）小鼠模型（闭塞60分钟，n = 15/组），并给予CI-amidine处理，以证明NET对卒中相关脑损伤的影响。从小鼠脑组织中分离原代神经元，通过流式细胞术和TUNEL实验评估NET对神经元凋亡的影响。此外，用FKBP5过表达和敲低载体转染BV2小胶质细胞，检测小胶质细胞极化、中性粒细胞NETs形成及潜在的分子作用机制。具体方法：通过ELISA检测H3cit、MPO-DNA、IL-1β、IL-10、TNFα和iNOS的水平；通过病理染色观察神经元形态变化；通过流式细胞术和TUNEL染色观察神经元凋亡；通过Western blot检测FKBP5、CD206、CCL5和MAPK通路的蛋白水平。结果：在本研究中，我们观察到缺血性卒中患者中FKBP5显著上调，这与NET标志物（如H3cit和MPO-DNA复合物）表达增加相关。这种上调与卒中严重程度和结局相关。在短暂大脑中动脉闭塞（tMCAO）小鼠模型中，使用NET抑制剂CI-amidine治疗可显著减少脑损伤、梗死面积和NET标志物水平，提示靶向NETs具有治疗潜力。我们进一步发现FKBP5调节小胶质细胞向促炎性M1表型极化并促进NET形成。FKBP5与CCL5相互作用，增强MAPK通路激活并增加促炎细胞因子（包括TNF-α和IL-1β）的产生。使用MAPK通路抑制剂AZD6244干预可有效抑制这些效应。结论：目前的研究结果表明，FKBP5可能调节CCL5介导的p38 MAPK信号通路和NET形成，从而促进卒中后神经炎症和神经元凋亡。需要进一步的前瞻性研究来验证FKBP5作为缺血性卒中治疗靶点的潜力。