STQJD抗脑缺血再灌注损伤作用及机制的NOX4/ROS/NF-κB信号通路研究

目的：本研究旨在探讨舒调气机方（STQJD）对大鼠脑缺血再灌注损伤模型的作用并阐明其作用机制。方法：采用神经行为学评分、2,3,5-三苯基氯化四氮唑（TTC）、尼氏和末端脱氧核苷酸转移酶dUTP缺口末端标记（TUNEL）染色评估STQJD对缺血性卒中（IS）的治疗效果。采用网络药理学研究STQJD的潜在机制。检测大鼠血清中活性氧（ROS）含量和炎症标志物的表达水平。采用RT-qPCR和Western blotting检测大鼠脑组织中核因子κB（NF-κB）、NADPH氧化酶4（NOX4）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、NOD样受体家族吡啉结构域蛋白3（NLRP3）、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、Toll样受体4（TLR4）和半胱氨酸依赖性天冬氨酸特异性蛋白酶-1（Caspase-1）的mRNA和蛋白表达水平。免疫荧光检测NF-κB和TNF-α蛋白表达。结果：STQJD显著改善大脑中动脉闭塞（MCAO）大鼠的神经功能，减少脑梗死体积，减轻神经元损伤和凋亡。基因本体论（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）分析显示，STQJD的抗IS作用与NOX4/TLR4/NF-κB/TNF-α信号通路相关。STQJD降低了MCAO大鼠血清中炎症标志物（包括TNF-α、白细胞介素-1β（IL-1β）和白细胞介素-18（IL-18））的水平，以及脑组织中TLR4、NOX4、NLRP3、NF-κB、ASC、TNF-α和Caspase-1的mRNA和蛋白表达。结论：STQJD通过调节NOX4/TLR4/NF-κB/TNF-α信号通路，减轻炎症和氧化损伤，发挥神经保护作用，有效改善MCAO/R大鼠的IS。