铂类化疗药物诱导的氧化应激影响小鼠间充质干细胞中DNA修复基因的转录反应

顺铂和奥沙利铂是治疗多种癌症中使用最广泛的抗癌药物之一。然而，这些药物对正常细胞和成体干细胞的细胞毒性是一个主要问题。目的：本研究旨在确定铂类药物在小鼠间充质干细胞（mMSCs）中诱导的氧化应激。方法：培养mMSCs，并用顺铂和奥沙利铂浓度（5 μM、15 μM和25 μM/L）处理1、4、24、48和72小时。观察细胞形态变化和活力。通过8-羟基-2'-脱氧鸟苷（8-OHdG）的表达评估氧化应激。通过吖啶橙/溴化乙锭（AO/EB）染色确定坏死性凋亡。此外，使用Taq-Man定量实时聚合酶链反应（TaqMan-qRT-PCR）测量DNA修复基因的mRNA水平，特别是参与错配修复（MMR）的基因，包括MLH3、MSH2、MLH1、MSH6和PMS2，以及核苷酸切除修复（NER）途径的基因，如ERCC1。结果：与5 μM和15 μM相比，25 μM顺铂和奥沙利铂在72小时时显著影响mMSCs的增殖和形态。在25 μM药物处理的mMSCs中，8OHdG阳性和坏死性凋亡细胞在24至72小时显著升高（P < 0.001）。顺铂和奥沙利铂在mMSCs中产生的浓度和时间依赖性氧化应激在mRNA水平上扰乱了DNA修复基因的表达（P < 0.001）。顺铂在24小时显著上调MLH1和PMS2的表达（≥ 3.0倍），而在72小时下调MSH2、MLH1、MSH6和PMS2的表达（≤ 0.5倍）。然而，奥沙利铂在24-48小时明显引起MLH3和ERCC1表达上调（≥ 3.0倍），并在72小时下调MSH2、MLH1、MSH6、PMS2和ERCC1的表达（≤ 0.5倍）。结论：这表明组织和器官中的成体干细胞在癌症治疗期间极易受到铂类药物的影响。对局部治疗的进一步研究可能有助于预防对正常细胞的不良影响。