建立牙周炎模型
模拟人类牙周炎病理状态。
使用结扎丝和Pg菌建立大鼠上颌第一磨牙牙周炎模型,分为两个阶段,每阶段15天。
Invisible appliance promotes bone reconstruction via modulating the periodontal immune microenvironment.
包含体内动物模型(结扎诱导牙周炎大鼠)、多种检测方法(micro-CT、TRAP、流式、IHC、qRT-PCR)及机制验证(Th17/Treg、RANKL/OPG、致病菌),多层级证据。
SD大鼠牙周炎模型(结扎诱导) 固定矫治器治疗模型 隐形矫治器治疗模型
六组设计:对照、模型、刮治0天、无矫治器、固定矫治器、隐形矫治器 治疗时间点:3、7、14、21天 基础治疗:龈上/龈下刮治后每日刷牙2周 隐形矫治器每3.5天更换,每次移动0.1mm
提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。
按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。
模拟人类牙周炎病理状态。
使用结扎丝和Pg菌建立大鼠上颌第一磨牙牙周炎模型,分为两个阶段,每阶段15天。
控制牙周炎症,模拟临床基础治疗。
对建模成功的大鼠进行龈上洁治和龈下刮治,并每日刷牙2周,直至牙龈无红肿。
比较不同矫治器对牙周炎的治疗效果。
将基础治疗后的牙周炎大鼠分为无矫治器、固定矫治器和隐形矫治器组,分别接受相应处理21天。
评估不同治疗对牙槽骨吸收的影响。
通过micro-CT扫描上颌骨,测量CEJ-AC距离。
评估不同治疗对破骨细胞活化的影响。
通过TRAP染色检测破骨细胞数量。
评估不同治疗对免疫细胞平衡的影响。
通过流式细胞术检测血液中Th17和Treg细胞比例。
探索不同治疗调节免疫和骨代谢的机制。
通过IHC和qRT-PCR检测RORγt、Foxp3、RANKL、OPG及致病菌(Pg、Aa、Tf)的表达。
评估免疫细胞比例与疾病指标的相关性。
对Th17、Treg细胞比例与RANKL、OPG、破骨细胞比例及CEJ-AC进行相关性分析。
按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。
| 实验环节 | 名称 | 品牌 | 货号 |
|---|---|---|---|
| 建立牙周炎模型 | 0.25mm不锈钢结扎丝 | XIHUBIOM | -- |
| 4-0丝线缝合线 | Yangzhou Jinhuan Medical Appliance Factory | -- | |
| 矫治器治疗 | 隐形矫治器 | Xian Henghui Technology Co., LTD. | -- |
| 检测牙槽骨吸收 | SkyScan 1176微型CT | BRUKER | -- |
| TRAP染色 | TRAP染色液 | Solarbio | G1492 |
| 流式细胞术 | PMA/离子霉素混合物 | MedChem Express | HY-18739/HY-13434 |
| BFA/莫能菌素混合物 | MedChem Express | HY-16592/HY-N0150 | |
| ER780-CD3抗体 | Elabscience | E-AB-F1228S | |
| PerCP-eFluor™ 710-CD8a抗体 | ThermoFisher Scientific | 46-0084-82 | |
| APC偶联CD25抗体 | Multi Sciences | 70-F3102503-100 | |
| FITC偶联CD4抗体 | Elabscience | E-AB-F1105C | |
| PE偶联Foxp3抗体 | eBioscience | 12-5773-82 | |
| CytoFLEX流式细胞仪 | Beckman Coulter | -- | |
| 免疫组化 | 抗FOXP3抗体 | Bioss | bs-10211R |
| 抗RANKL抗体 | Bioss | bs-0747R | |
| 抗RORγt抗体 | Bioss | bs23110R | |
| 抗OPG抗体 | ABclonal | A2100 | |
| 山羊抗兔IgG二抗 | Multi Sciences | GRA0072 | |
| CX40显微镜 | SOPTOP | -- | |
| qRT-PCR | TriQuick试剂 | Solarbio | R1100 |
| All-in-One First-Stand cDNA合成试剂盒 | TransGen Biotech | AT341 | |
| Green qPCR SuperMix试剂盒 | TransGen Biotech | AQ602 | |
| ABI QuantStudio 1实时荧光定量PCR仪 | ThermoFisher Scientific | -- |
汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。
| 环节 | 核对要点 |
|---|---|
| 动物模型 | 大鼠品系、年龄、体重、性别;结扎丝规格;建模时长;Pg浓度及频率。 阅读提示:Materials and methods - Animals; Establishment of ligation-induced periodontitis |
| 分组与治疗 | 六组设置;每时间点样本量(n=4);基础治疗细节;矫治器类型;隐形矫治器更换频率及移动量。 阅读提示:Materials and methods - Experimental design; Periodontal treatment |
| 样本采集 | 采血时间点;上颌骨固定方法;脱钙时间。 阅读提示:Materials and methods - Flow cytometry analysis; TRAP staining |
| 检测方法 | micro-CT参数;TRAP染色条件;流式抗体及克隆号;IHC抗体稀释度;qRT-PCR引物序列及内参。 阅读提示:Materials and methods - Detection of alveolar bone resorption; TRAP staining; Flow cytometry analysis; Immunohistochemical assay; qRT-PCR detection |