硝酰基通过PI3K/Akt/mTOR通路保护H9C2细胞免受H/R诱导的损伤并抑制自噬

背景 心肌缺血再灌注损伤（MIRI）是心力衰竭治疗中的重要并发症，其治疗尚未取得满意进展。硝酰基（HNO）对心力衰竭显示出保护作用，然而HNO对MIRI的作用及其潜在机制仍 largely unclear。 方法 本研究通过体外缺氧/复氧（H/R）诱导H9C2细胞损伤建立MIRI模型。通过细胞计数试剂盒-8测定评估细胞活力。通过流式细胞术检测HNO对凋亡的影响。应用DCFH-DA荧光探针法检测细胞内活性氧（ROS）水平。通过透射电子显微镜观察线粒体和自噬体的形态。通过western blot检测凋亡、自噬和PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白。 结果 HNO组H9C2细胞的活力显著增加。HNO抑制凋亡并调节关键凋亡蛋白的表达，包括Bax和Bcl-2。HNO降低ROS水平并减轻H/R诱导的线粒体损伤。HNO还抑制自噬并调节关键自噬相关分子的表达，包括LC3II、p62和Beclin1。进一步实验表明，HNO的作用是通过上调PI3K/Akt/mTOR通路介导的。雷帕霉素逆转了HNO对H/R诱导的H9C2细胞自噬的抑制作用，这取消了HNO的保护作用。 结论 本研究首次提供证据表明HNO通过激活PI3K/Akt/mTOR通路抑制自噬，从而保护H/R诱导的心肌细胞。