血浆来源细胞外囊泡中的miRNA和中性粒细胞相关膜蛋白对脓毒症患者器官功能障碍和预后的早期预测

目的：脓毒症引起的器官功能障碍的发病机制仍然难以捉摸，死亡率仍然高得惊人。我们试图研究血浆和中性粒细胞（PMNs）之间细胞外囊泡（EVs）介导的通讯特征，并阐明血浆来源EVs（plasma-EVs）中的miRNA和PMN相关膜蛋白是否与脓毒症引起的器官功能障碍和预后相关。方法：从健康对照（N=3）和感染性休克患者（N=3）入住ICU后的血液样本中分离PMN来源的EVs（PMN-EVs）。我们对分离的EVs进行miRNA测序，随后进行生物信息学分析。在训练队列中成功建立了用于比较PMN-EVs和plasma-EVs的miRNA模型。此外，在验证队列中证实了plasma-EV模型中的miRNA和PMN相关膜蛋白。采用logistic回归模型、受试者工作特征（ROC）曲线和Kaplan-Meier分析来评估诊断和/或预后的效率。此外，进行体内和体外实验以探讨plasma-EVs在PMNs自噬中的作用。结果：健康对照和感染性休克患者之间的PMN-EVs中有55个miRNA显著差异表达。此外，在验证队列中证实了plasma-EV模型（6个miRNA和8种PMN相关膜蛋白），表明miR-34a-5p、miR-503-5p、miR-4772-3p、ITGAM、MPO和MMP9可作为区分肺、肝和肾功能障碍的脓毒症生物标志物。Kaplan-Meier生存分析显示，miR-34a-5p、miR-4772-3p、ITGAM和MMP9是潜在的预后预测因子。最后，我们发现脓毒症患者的plasma-EVs对PMNs自噬具有抑制作用，这种作用可被EV抑制剂如GW4869和依诺肝素逆转。结论：这些发现表明，plasma-EVs中的miRNA和PMN相关膜蛋白可作为识别脓毒症诱导的器官功能障碍和预测预后的有价值的诊断工具，使医生能够主动管理脓毒症并改善脓毒症患者的预后。