利用细胞膜色谱-质谱联用技术筛选地菍抗糖尿病骨质疏松症的活性成分

背景：地菍（Melastoma dodecandrum Lour.，MD）是一种传统草药，具有降血糖、抗氧化和抗炎作用，常用于治疗糖尿病、骨关节炎和骨质疏松症。然而，其对糖尿病骨质疏松症的特异性活性成分仍不清楚。目的：本研究旨在利用细胞膜色谱联用质谱技术鉴定MD中的关键活性成分，并在体外验证其作用。方法：建立AGEs诱导的成骨细胞损伤模型。采用MTT法检测细胞活力，使用生化试剂盒评估ALP活性。采用Western blotting检测成骨相关蛋白OCN、RUNX2及AGE受体蛋白RAGE的表达水平。采用ELISA检测SOD、MDA、CAT、GPx的水平。PCR定量TNF-α的表达以评估MD的保护作用及潜在机制。基于AGEs诱导的成骨细胞膜色谱-质谱方法，根据化合物与成骨细胞膜的亲和力，快速鉴定潜在活性化合物。细胞实验进一步验证了特征成分异牡荆素的活性。结果：MD显著改善AGEs损伤的成骨细胞的细胞活力，增强ALP、SOD、CAT和GPx活性，降低MDA水平，增加OCN和RUNX2蛋白表达，降低TNF-α mRNA和RAGE蛋白表达。细胞膜色谱鉴定了20种化学成分，包括13种黄酮、4种有机酸、1种苯丙素、1种萜类和1种生物碱。细胞实验证实异牡荆素对成骨细胞具有显著的保护活性，并能抑制成骨细胞膜上特异性受体RAGE的表达，与MD的作用一致。结论：MD及其活性成分异牡荆素对AGEs诱导的成骨细胞损伤具有保护作用，为后续药物开发提供了依据。