Resistin通过激活AMPK/mTOR信号通路和自噬缓解脂多糖诱导的牛肺泡巨噬细胞炎症

目的：Resistin（RETN）是一种脂肪细胞特异性激素，参与代谢并调节细胞炎症。我们的研究旨在评估RETN处理对牛肺泡巨噬细胞（BAMs）自噬的影响及其潜在的分子和生物学机制。方法：筛选RETN+脂多糖（LPS）对巨噬细胞的最佳浓度，然后与肺泡巨噬细胞共培养。使用透射电子显微镜（TEM）检查BAMs中的自噬体。使用实时定量PCR（qRT-PCR）检测微管相关蛋白轻链3（LC3）和p62的mRNA表达。使用Western blot（WB）检测LC3和p62的蛋白表达。通过免疫荧光（IF）观察LC3和p62蛋白在细胞中的分布。使用酶联免疫吸附测定（ELISA）检测白细胞介素（IL）-1β、IL-6和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的浓度。使用WB检测腺苷单磷酸活化蛋白激酶（AMPK）、p-AMPK、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）和p-mTOR的蛋白表达。结果：用RETN或LPS处理BAMs增加了自噬体的数量和LC3II/LC3I的比值，并降低了p62蛋白的表达水平。与LPS处理相比，RETN处理显著触发自噬。此外，RETN处理后p-AMPK/AMPK和p-mTOR/mTOR的比值分别上调和下调，提示AMPK/mTOR信号通路的激活是RETN介导的BAMs自噬所必需的。另外，与单独LPS处理组相比，LPS和RETN共处理组的LC3-II/LC3-I比值较低，IL-1β、IL-6和TNF-α的浓度显著降低。然而，自噬和LPS诱导的炎症均被RETN处理部分缓解。结论：RETN可以通过激活AMPK/mTOR信号通路促进BAMs中的自噬，可能有助于预防LPS诱导的炎症。