中性粒细胞胞外诱捕网诱导淤胆性肝病中的肝内血栓形成倾向和肝损伤

背景：淤胆性肝病诱导局部和全身高凝状态，中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）是主要驱动因素。这些NETs与梗阻性黄疸患者肝功能下降有关。然而，NETs对淤胆性肝病中肝脏高凝状态的影响仍不清楚。方法：我们利用胆管结扎建立实验小鼠，并分析肝脏中NETs的形成。通过Western blot和免疫组化技术观察肝脏中的纤维蛋白沉积、组织因子表达和炎症。分离的肝窦内皮细胞（LSECs）与NETs共孵育，通过凝血蛋白生成实验和内皮通透性测量检测内皮促凝活性。在体内和体外实验中，应用DNase I来阐明NETs对肝内高凝、肝毒性、LSEC和巨噬细胞活化或损伤的影响。结果：与假手术小鼠相比，胆管结扎小鼠肝组织中NETs水平显著升高，同时伴有中性粒细胞浸润、组织坏死、纤维蛋白沉积和血栓形成倾向。值得注意的是，NETs导致LSEC上磷脂酰丝氨酸和组织因子暴露，增强凝血因子Xa和凝血酶的产生。这种增强的促凝活性可以通过DNase I降解NETs而逆转。此外，NETs诱导的LSEC通透性改变，表现为VE-钙黏蛋白表达增加和F-肌动蛋白回缩，这可以通过DNase I挽救。同时，NET形成与Kupffer细胞活化及炎症因子的形成相关。结论：NETs促进肝内凝血和炎症的激活，导致肝组织损伤。针对NET形成的策略可能为治疗淤胆性肝病提供潜在的治疗方法。